Serpientes Asesinos por naturaleza: Revisión de los caminos evolutivos de las víboras colombianas

Mordeduras, venenos y serpientes venenosas de Colombia

Capítulo 3 Asesinos por naturaleza: Revisión de los caminos evolutivos de las víboras colombianas

Por: Teddy Angarita-Sierra, Jaime A. Pereañez, Sergio D. Cubides-Cubillos, Mónica M. Saldarriaga-Córdoba.

Palabras Clave: Diversidad biológica, colmillos, serpientes venenosas, mordedura de serpiente, región neotropical

55 páginas
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Históricamente, las víboras conocidas comúnmente como mapaná, cascabel, verrugoso y patoco, han recibido mucha atención debido a su importancia médica, así como a la notable diversidad de sus venenos, formas y anatomía (p. ej., fosetas loreales con detección infrarroja, cascabeles y toxinas letales). Cientos de artículos y libros han sido publicados sobre las víboras del hemisferio occidental, consolidado un amplio y robusto marco conceptual que ha permitido comprenderlas. Sin embargo, la mayoría de estas contribuciones se han centrado en especies que habitan las zonas templadas del continente o en países tropicales como Brasil, Costa Rica y México. Esta disparidad ha limitado nuestra comprensión de la diversidad y endemismos de las víboras que habitan en regiones geográficamente complejas de América tropical, como lo es Colombia. Las víboras colombianas cuentan con fascinantes historias evolutivas, así como una asombrosa diversidad morfológica e intrincados patrones de distribución geográfica, que aun aguardan por ser comprendidos a profundidad. Actualmente, el veneno de las víboras colombianas y sus diversas formas tienen una importancia científica considerable, convirtiéndose en sistemas modelo que permiten explorar los principios de la biología evolutiva, desde los genes, individuos y poblaciones, hasta contextos macroevolutivos. Con base en una revisión detallada de la información disponible, así como a partir de la generación de nueva evidencia, en este capítulo revisamos y discutimos los linajes evolutivos, venómica y actividades biológicas de los venenos de los vipéridos presentes en Colombia.

1. Depredadores de emboscada: Víboras alrededor del mundo

El veneno, es un rasgo biológico sorprendente que ha evolucionado de forma independiente en numerosos organismos en nuestro planeta. No obstante, este rasgo, que caracteriza algunos grupos de serpientes, culturalmente genera reacciones y actitudes encontradas, al evocar al mismo tiempo miedo, fascinación y respeto, haciendo que las serpientes sobre salgan sobre todas especies del reino animal como un animal de poder [1]. Sin embargo, en todo el mundo, sólo un puñado de especies de serpientes posee un veneno con la potencia necesaria y un sofisticado mecanismo de administración de veneno capaces de representar una amenaza real para la vida de sus presas o personas (ver Capítulo 5). Aproximadamente, el 10% de todas las serpientes actuales pertenecen a la familia Viperidae, las cuales son comúnmente conocidas como víboras [2,3]. Esta familia se divide taxonómica y filogenéticamente en tres subfamilias: Azemiopinae (víboras de Fea), Crotalinae (víboras con foseta termoreceptora) y Viperinae («víboras verdaderas» o «víboras sin fosas»).

Actualmente, se reconocen alrededor de 383 especies de vipéridos, agrupadas en 37 géneros [4]. Trece de estos géneros se distribuyen en el neotrópico americano: Agkistrodon[5], Atropoides[6], Bothriechis[7], Bothrocophias[8], Bothrops[9], Cerrophidion[10], Crotalus[11], Lachesis[12], Metlapilcoatlus[13], Mixcoatlus[14], Ophryacus[15], Porthidium[16], Sistrurus[17]; 24 géneros se distribuyen a lo largo de los continentes asiático, europeo y africano: Atheris[18], Azemiops[19], Bitis[20], Calloselasma[21], Causus[22], Cerastes[11], Craspedocephalus [23], Daboia[20], Deinagkistrodon[24], Echis[25], Eristicophis[26], Garthius[27], Gloydius[28], Hypnale[29], Macropvipera[30], Montatheris[31], Montivipera[32], Ovophis[33], Proatheris[31], Protobothrops[34], Pseudocerastes [35], Trimeresurus[36], Tropidolaemus[22], y Vipera[37].

Entre todas las serpientes venenosas, el sistema de administración de veneno de los vipéridos es el más especializado. Se caracteriza por la presencia de colmillos frontales, largos y tubulares (canal interno), ensamblados sobre un hueso maxilar móvil, que presentan canales conductores de veneno [38] (ver Capítulo 5). Los colmillos desarrollados por los vipéridos representan uno de los rasgos funcionales más notables en la naturaleza, estando directamente relacionados con su historia de vida y estrategia de alimentación. Las víboras son principalmente depredadores de emboscada, siendo especies comúnmente sedentarias que consumen principalmente presas de «sangre caliente» (endotermos) durante su edad adulta [38,39]. Como consecuencia de la evolución su eficiente y sofisticado mecanismo de inoculación de venenos para la captura de presas, disuasión y defensa ante depredadores, convierte a las víboras en agentes biológicos de importancia médica debido a la elevada incidencia anual de accidentes ofídicos (ver Capítulo 9).

En estos cazadores de emboscadas, la composición del veneno limita la selección de presas, de ahí que su dieta tenga notorias adaptaciones y especificidades. Por ejemplo, los venenos de las serpientes recién nacidas o juveniles exhiben una mayor letalidad (DL50) que la observada en los adultos [40], indicando que existen diferencias bioquímicas relacionadas con los cambios en la dieta y desarrollo de los individuos. De hecho, estudios proteómicos han revelado que la variación ontogenética en la composición del veneno es un indicador importante para comprender la dinámica y las acciones de las toxinas de dos las víboras colombianas con mayor importancia médica: Bothrops atrox[41] y Bothrops asper[42,43].

Para comprender cómo evolucionaron las estrategias de alimentación en las serpientes, desde el proceso mecánico para dominar la presa (constricción) hasta el uso de un arsenal químico (inyección de veneno), es imperativo comprender primero los numerosos procesos a través de los cuales la selección natural ha favorecido la armonía entre divergencia y adaptación [44]. Este equilibrio ha permitido el surgimiento de una gran heterogeneidad en la composición, función y acción de las toxinas de los venenos de las víboras. En este capítulo presentamos una breve descripción de los últimos 50 años de investigación sobre la historia evolutiva y natural de las especies de víboras que habitan los ecosistemas tropicales de Colombia, enfocándose en las especies de serpientes de mayor importancia médica.

2. Perspectivas evolutivas y geográficas de la colonización y diversificación de las víboras en el trópico suramericano

El trabajo pionero realizado por William L. Burger [45], constituye uno de los grandes aportes en la compresión de la sistemática y biología de las víboras suramericanas. Burger [45] aclaró la delimitación de varios grupos de víboras y generó la descripción de nuevos caracteres de uso taxonómico para la familia Viperidae. Su trabajo propuso la división del género Bothrops en cinco géneros morfológicamente divergentes: Bothriechis , Bothriopsis , Bothrops , Ophryacus y Porthidium. Hoy en día, la validez de Bothriopsis como un género divergente de Bothrops es controvertida, aunque históricamente algunos autores consideraron a Bothriopsis como un género válido, actualmente numerosos estudios filogenéticos han cuestionado su distinción del género Bothrops. No obstante, el trabajo de Burger [45] fue crucial porque desencadenó una serie de reordenamientos nomenclaturales que permitieron describir géneros derivados de Porthidium, como son los géneros Atropoides[6] y Cerrophidion [10].

Posteriormente, Avise [46] publicó uno de los estudios pioneros que examinaron hipótesis filogenéticas y filogeográficas de las víboras americanas, a partir del uso de marcadores moleculares. Avise, estudió las relaciones ancestrales que no se ven afectadas por la selección convergente mediante la evaluación de marcadores moleculares de origen mitocondrial, usándolos como evidencia independiente, y asumiendo que es poco probable que estos rasgos se vean influenciados por las mismas presiones selectivas que actúan sobre los rasgos morfológicos [47]. En consecuencia, a partir de 1990, las secuencias de ADN se han venido utilizado para inferir las líneas de tiempo histórico en las que diferentes clados(=linajes) de vipéridos divergieron, ayudando a comprender la diversificación morfológica en un contexto biogeográfico [48]. Por lo tanto, en estos estudios iniciales que examinaron el valor evolutivo de los genes mitocondriales, se reveló, por ejemplo, que genes como el citocromo b yNADH son predictores adecuados de las relaciones filogenéticas, en gran parte, debido a la evolución más lenta descrita para las unidades ribosomales 12s y 16s [49].

Los trabajos de Parkinson et al. [50]y Gutberlet Jr., et al. [51] identificaron y sugirieron la existencia de dos grupos monofiléticos de víboras en América: un clado de especies norteamericanas que agrupa a Agkistrodon, Atropoides, Cerrophidion, Crotalus,Metlapilcoatlus, Ophryacus y Sistrurus, y un segundo clado que agrupa a los demás géneros ubicados en la región Neotropical. Un primer análisis recuperó los vipéridos del continente americano como un grupo monofilético [50], pero sin una identificación adecuada de su grupo hermano, dejando dudas sobre cómo se dio la colonización de América del Norte y la divergencia posterior entre el norte templado y tropical. Además, este estudio [50] advirtió que la especie reconocida en ese momento como como Porthidium hyoprora correspondía a un linaje más estrechamente relacionado con el género Bothrops (coincidiendo con la primera descripción de Bothrops hyoprora) [52], que años más tarde sería la base para la descripción de un nuevo género denominado Bothrocophias. Actualmente, este nuevo grupo incluye otras especies que anteriormente también estuvieron agrupadas con el género Bothrops; como: B. campbelli, B. hyoprora,B. microphthalmus, y B. myersi[8].

En Colombia, la prominente elevación de las tres Cordilleras de los Andes jugó un papel fundamental en la cladogénesis de numerosas especies de víboras, como las especies del grupo Bothrops, un grupo en el que sus dos linajes principales están distribuidas alopátricamente [53]. Geológicamente, la Cordillera de los Andes alcanzó su elevación máxima de más del 40% hasta la era Neógena, lo que dio lugar a una formación montañosa significativa sólo durante el Mioceno tardío y especialmente durante el Plioceno, cuando el proceso orogénico se aceleró rápidamente [54]. Por lo tanto, se infiere que la división inicial entre los grupos interandinos de víboras en el norte de Suramérica se atribuye a un evento de dispersión desde el Caribe de mesoamericano, que determinó la historia biogeografía de las especies en esta región.

Por consiguiente, los estudios moleculares de las víboras se han centrado principalmente en la región neotropical, procurando examinar varias hipótesis que podrían explicar la asombrosa diversidad de la subfamilia Crotalinae [55–57]. Las reconstrucciones filogenéticas, son principal herramienta que se ha empleado para explicar las trayectorias evolutivas que dan origen a los diferentes tipos de plantas y animales que actualmente coexisten con los seres humanos. A través de estas hipótesis de relación histórica, se han postulado diferentes teorías que intentan explicar la diversidad de organismos durante escalas de tiempo geológicas (p. ej., durante los importantes períodos como Plioceno y Mioceno), relacionando los hitos geológicos como la orogenia andina o el levantamiento del Istmo de Panamá, con las distribuciones geográficas actuales de varias especies.

El levantamiento de los Andes en Suramérica es uno de los procesos geológicos más significativos en la evolución de numerosas especies de vertebrados [58,59]. Por ejemplo, algunos autores utilizaron el análisis de migración histórica en poblaciones de mapanás (B. asper) para examinar sus recientes eventos de diversificación en Suramérica [60]. Salazar et al. [60] emplearon esta aproximación incluyendo además un análisis de múltiples procesos demográficos de divergencia que no son factibles de inferir utilizando únicamente métodos basados en la reconstrucción de árboles filogenéticos [61,62].

De hecho, las especies mapanás han demostrado que el impacto de la diversidad del hábitat está correlacionado con la variabilidad fenotípica, un fenómeno biológico inherente a las diferentes especies del género Bothrops[63,64]. Además, la ausencia de otros potenciales competidores/adversarios al inicio de la dispersión de la especie ancestral sobre las distintas regiones en el norte de Suramérica, puede haber contribuido a la propagación de las mapanás en la mayoría de las regiones geográficas de Colombia. No obstante, es imperativo resaltar que ciertos géneros como Porthidium(P. nasutumy P. lansbergii) y Lachesis (L. acrochorday L. muta) exhiben convergencia geográfica con B. aspery B. atroxen algunas ecorregiones y localidades. Sin embargo, las especies de Porthidium tambiénexhiben una distribución amplia en la zona occidental y suroccidental del Pacífico colombiano [65], además de estar presentes en toda la región del Caribe [66], lo que las convierte en especies simpátricas con B. asper.

Actualmente, los métodos bioinformáticos han permitido el análisis de extensos conjuntos de datos (datos genómicos), permitiendo la evaluación de intrincados procesos históricos de dispersión con una alta resolución [67-69]. Además, el genoma ha demostrado ser especialmente útil debido a la exactitud y precisión con la que se estiman los diferentes parámetros a nivel genético [70-72]. En perspectiva, las incertidumbres sistemáticas en ciertos estudios de víboras durante la última década sugieren que es necesario el uso de la taxonomía integrativa. Esta herramienta usa varias líneas de evidencia de forma conjugada pero independiente, entre, por ejemplo, características morfológicas, comportamentales, análisis de divergencia genética, filogenias moleculares y coalescentes, para la delimitación de especies y compresión de eventos de aislamiento geográfico y otros procesos ecológicos [73–75]

2.1 Comprendiendo cómo los eventos de diversificación afectan la diversidad de las especies de víboras colombianas

Se han propuesto numerosas hipótesis sobre la diversificación de las serpientes neotropicales, incluida la especiación alopátrica y el desplazamiento ecológico a través de cadenas montañosas [58], ríos que actuaron como barreras precigóticas o la fragmentación del hábitat causada por el cambio climático durante el Pleistoceno [76]. La deriva continental de Suramérica y el levantamiento de los Andes dieron como resultado la dinámica evolutiva que sustenta la base de la diversidad en numerosas ecorregiones del Neotrópico [77–79]. Estos fenómenos orogénicos han planteado numerosas interrogantes sobre, cómo y cuántos grupos taxonómicos colonizaron la región Andina; cómo estos grupos ancestrales consiguieron diferenciarse para habitar miles de años más tarde las tierras bajas y las laderas orientales de Colombia, una vez que los Andes alcanzaron sus elevaciones actuales [80]. Por lo tanto, es importante entender cómo la diversidad de víboras en Suramérica está relacionada con el intercambio biótico entre Norte y Centro América a lo largo del período Terciario, especialmente después de la aparición del Istmo de Panamá [81].

La mayoría de los eventos de especiación en las regiones tropicales están influenciados por el aislamiento inducido por la alteración del paisaje (p. ej., vicarianza) el cual está intrínsecamente ligado a una gama más amplia de procesos biológicos y geológicos [60]. A pesar de esto, las hipótesis filogeográficas actuales propuestas para la mayoría de las especies de víboras suramericanas no han considerado la influencia de los procesos demográficos [55,57,60,82]. De hecho, al examinar los patrones filogeográficos de distintas especies con rangos superpuestos o parcialmente superpuestos, puede revelar como eventos comunes pueden tener un impacto similar en los patrones evolutivos de numerosos taxones [83]. Sin embargo, lo anterior también pueden sugiere inconsistencias entre taxones simpátricos debido a la formación de linajes, la variación en el tamaño efectivo de la población, la extinción, dispersión, o la baja sensibilidad ante eventos vicariantes [84-86].

En contraste, la explicación dada por procesos de especiación parapátrica a lo largo del eje vertical montañoso de los Andes, podría explicar las adaptaciones específicas en algunas especies que presentan características asociadas con gradientes ecológicos [87]. En consecuencia, la capacidad de algunas especies de expandirse hacia nuevos nichos que aparecieron durante un tiempo específico pudo juagar un rol fundamental en la diversificación de las víboras interandinas pertenecientes a los géneros Bothrops,Bothrocophias,Bothriechis,Lachesis y Porthidium.

Por lo tanto, se ha sugerido que la rápida divergencia de especies de vipéridos a partir de un ancestro común (con fosetas termosensibles), representa un hito evolutivo importante que permitió la diversificación exitosa de esta familia de serpientes [3]. Así, desde un punto de vista ecológico, estos linajes consiguieron colonizar diversos ambientes y hábitats, que van desde bosques tropicales de tierras bajas en Centroamérica, la selva húmeda tropical del Amazonas, logrando alcanzar las áreas abiertas al sur de los Andes y la Patagonia [2,55]. Sin embargo, la taxonomía, historia natural y relaciones filogenéticas de numerosas especies en Suramérica aún son pobremente conocidas [2,28,57,88]. Esto ocasiona que varios grupos de víboras muestran patrones aparentemente endémicos (p. ej., Bothrocophias colombianus); o se consideran complejos de especies que requieren una reevaluación taxonómica y una mejor resolución de sus patrones filogenéticos (ver Capítulo 1).

Uno de los desafíos importantes que enfrenta la herpetología en Colombia es el número limitado de marcadores moleculares que se han examinado, así como el bajo número de individuos o poblaciones analizadas en varias especies de vipéridos. Además, el conocimiento limitado sobre las tasas de evolución molecular de grupos de genes nucleares en serpientes impide un examen filogeográfico e histórico exhaustivo de las víboras encontradas en el norte de Suramérica.

2.2 Una familia con diferentes complejos de especies

En Colombia, así como en todos los ecosistemas andinos, los factores ambientales más importantes que afectan la distribución de los siete géneros conocidos de víboras son la elevación y la complejidad orográfica. Estos factores se proponen como algunos de los principales impulsores de las complejas relaciones filogenéticas y la alta diversidad venómica en varias especies de vipéridos. Por ejemplo, un grupo reducido de especies de víboras colombianas alcanzan elevaciones entre los 1.500 a 3.600 metros sobre el nivel del mar (en adelante msnm), siendo 1500 m el límite superior para la mayoría de las especies de víboras que habitan en las tierras bajas; 3,600 metros es el límite superior para las especies altoandinas (como Bothrocophiastulitoi, B. myrringae, Bothriechis schlegeliiyciertas poblaciones del complejo B. atrox) [2,75].

Dentro de las diversas regiones biogeográficas del norte de Suramérica, la proporción de especies venenosas puede oscilar entre el 9% y el 14% [89]. Por lo tanto, las zonas de distribución geográfica de la mayoría de las especies de víboras colombianas confluyen con algunas regiones de alta concentración de poblaciones humanas [90]. Como resultado, la dispersión de las víboras colombianas está asociada con áreas boscosas primarias, áreas boscosas secundarias, áreas destinadas a la agricultura a diferentes elevaciones, y cada vez más, con áreas urbanas (generalmente en expansión). En consecuencia, y debido a su amplio rango de distribución geográfica en Colombia, B. aspery B. atroxson las especies de serpientes venenosas de mayor importancia médica [64,91].

Históricamente, los géneros Bothrops y Porthidium han sido foco de un número significativo de revisiones y trabajos taxonómicos que han revelado una diversidad de linajes que no ha sido reconocida previamente a nivel de especie [63,92–97]. De hecho, durante las últimas dos décadas, algunas especies pertenecientes al género Bothrops han sido objeto de numerosos estudios filogenéticos y enfoques biogeográficos relacionados con su diversificación al norte de Suramérica [3,38,55,98,99]. Estas aproximaciones han revelado una complejidad taxonómica principalmente dentro del complejo de especies Bothrops asper-atrox.

En general, la mayoría de las investigaciones realizadas sobre las víboras presentes en Colombia indican que varias especies presentan una diversidad críptica, ya que sus relaciones filogenéticas y biogeográficas exhiben claras diferencias entre sus poblaciones, mientras que sus caracteres morfológicos conocidos presentan una baja variabilidad. A estos grupos de serpientes se les denomina complejos de especies, una categoría que describe la complejidad en su delimitación taxonómica (ver Capitulo 1) [53,63,75, 92–95]. Esta dificultad para distinguir especies morfológicamente (especies crípticas), y que a veces pueden presentar linajes genéticamente divergentes, se ha convertido en uno de los puntos más discutidos en trabajos publicados en sistemática molecular y en procesos de delimitación de especies en la actualidad.

Uno de los objetivos de esta sección es describir algunas de las investigaciones pioneras sobre la sistemática, los venenos y la evolución de las víboras colombianas. Con base en los datos publicados durante las últimas tres décadas, creemos que es necesario aumentar los estudios filogeográficos para poder analizar con robustez la diversidad críptica de taxones ya reconocidos [48,83,94, 96]. Esta información podría servir como una herramienta importante para determinar los esfuerzos de conservación destinados a mantener las poblaciones viables de linajes que aún están por descubrir [83].

Con base en la revisión de los principales trabajos que consolidan el conocimiento de las serpientes neotropicales, a continuación, presentamos un análisis sistemático y descriptivo de los principales grupos y complejos de especies de víboras de importancia médica en Colombia. Esta breve reseña busca mostrar no sólo la complejidad filogenética de los dos grupos principales (Bothrops y Porthidium), sino también, informar sobre las especies y los linajes con vacíos de información genética y proteómica.

Las Mapanás colombianas de mayor importancia médica: el complejo Bothrops asper-atrox

El género Bothrops exhibe una mayor divergencia genética en comparación con las otras víboras suramericanas. De hecho, las especies Bothrops exhiben linajes parafiléticos en relación con las especies encontradas en Centroamérica. La diversificación del género probablemente tuvo lugar en Suramérica [60]. Esta hipótesis sugiere que el ancestro común de todas las especies de Bothrops fue el primer vipéridos que colonizó Suramérica en algún momento durante el Mioceno, hace unos 10 millones de años [63]. Como resultado, solo un linaje de especies de Bothrops (B. asper) se extendió por Centroamérica, desde Panamá hasta México. Sin embargo, existen registros de distribución geográfica de una segunda especie de Bothrops (B. punctatus) en la región oriental de Panamá.

Figura 1. Ilustraciones de la cabeza del complejo Bothropsasper - atrox. (Superior) cabeza en vista lateral de Bothrops asperde Melgar, Tolima, Colombia (INSZ 138). (Inferior) Cabeza en vista lateral de Bothrops atroxde Puerto Carreño; Vichada (BOTATR00061). Ilustraciones de Óscar Ramírez.

Campbell y Lamar [2] sugirieron que las poblaciones colombianas de B. aspery B. atrox tienen distribuciones alopátricas. De hecho, B. asper(Figura 1 superior) se distribuye a lo largo de las regiones biogeográficas del Chocó y el Valle del Magdalena, así como a través de la región Caribe y valles interandinos de la macrocuenca Magdalena-Cauca [64,91]. Por su lado, Bothrops atrox(Figura 1 inferior) se encuentra en la región oriental de Colombia, sobre los grandes biomas de la Orinoquia y la Amazonia. Esta distribución concuerda con la hipótesis de dispersión ancestral de B. atrox, que propone existieron poblaciones preexistentes que habitaron los bosques ubicados al norte del Amazonas, que posteriormente colonizaron gradualmente las diferentes regiones que bordean el río Amazonas [97].

No obstante, existe la presencia de linajes relacionadas con B. asperyB. atroxenregiones geográficas simpátricas de los Andes orientales y occidentales de Colombia, ubicadas en los departamentos como Antioquia, Cauca y Chocó. Varios estudios han demostrado que ambas especies muestran una diferenciación filogenética reciente relacionada con la diversidad de su hábitat y con gradientes altitudinales [53,60,92,97].

El estado taxonómico del complejo B. asper-atrox dentro de las poblaciones colombianas ha sido poco explorado desde una perspectiva genética, y actualmente no existe una delimitación clara entre los linajes de estas especies que permita evaluar algunas de las hipótesis taxonómicas previamente descritas con base en evidencia morfológica. En particular, las poblaciones de la vertiente oriental de la Cordillera Oriental representan un problema desafiante aún sin resolver. Por ejemplo, algunas poblaciones de B. atroxde montaña han sido históricamente reportadas como Bothrops isabelae[98] y Bothrops colombiensis[99]. Bothrops isabelae inicialmente fue sinónimo de B. atroxen los años 90 [33,100], pero más tarde fue reconocida como especie en algunos de los trabajos pioneros sobre linajes de Bothrops suramericanos [92]. Análisis recientes [101] muestran aB. isabelae esfilogenéticamente cercana a B. atrox,yconuna divergencia genética aparentemente baja. Aun así, y aunque algunos autores reconocen aB. isabela como taxón válido, actualmente volvió a ser considerado sinónimo de B. atrox[55]. Además, Campbell y Lamar [2] consideran B. colombiensis como especie sinónima del complejo de especies formado por B. aspery B. atroxderivadas de poblaciones venezolanas.

Aclarar las relaciones filogenéticas entre las especies de Bothrops colombianasylas poblaciones de especies/linajes venezolanos nos permitirá comprender la dinámica de dispersión de estos taxones, proporcionando una alternativa al uso del concepto de especie unificada que ha sido ampliamente aplicado en análisis de complejos de especies con linajes geográficos altamente divergentes [102]. La complejidad para entender la sistemática del grupo B. atroxes un desafío previamente informado [63,88,103]. Algunos estudios sugieren que el linaje compuesto por las especies brasileras B. leucurus y B. moojenies el grupo hermano de B. atrox; otros estudios indican que B. atroxtiene relaciones evolutivas más estrechas con B. aspery el linaje B. isabelae[6,94,101,104]. Sin embargo, el grupo de especies asociadas al complejo B. atrox distribuido entre Colombia y Brasil, requiere una revisión taxonómica detallada debido a que las hipótesis taxonómicas basadas en morfología no son concordantes con los linajes mitocondriales descritos, y además estos últimos, tampoco concuerdan con las especies taxonómicamente reconocidas [103].

Un ejemplo histórico de esta marcada complejidad taxonómica para las especies del género Bothrops en Colombia, fue la denominación de nuevas especies derivadas de B. asperpropuestas por Folleco-Fernández[105]. Este autor reevaluó los límites taxonómicos dentro de B. asperpara las poblaciones del suroeste de Colombia, proponiendo aB. ayerbeiy B. rhombeatuscomo nuevas especies derivadas de B. asper. Sin embargo, esta propuesta taxonómica presentó un abordaje desprolijo e inadecuado de la descripción de las características empleadas en la delimitación B. ayerbeiy B. rhombeatus. A demás, los rasgos morfológicos y caracteres de diagnósticos empleados son ambiguos [106], y la ausencia de un análisis filogenético impide el reconocimiento de estas poblaciones como unidades evolutivas independientes a nivel de especies (ver Capitulo 1). De hecho, en la descripción inicial realizada por García [107] no se asignó ningún ejemplar tipo ni se realizó la descripción de un nuevo taxón, convirtiendo a B. rhombeatusen un nomen dubium (ver Capítulo 1).

Otro punto importante mencionado por Ramírez-Chaves and Solari [106] es que Folleco-Fernández[105] no asigno un neotipo para B. ayerbei y B. rhombeatus, así como tampoco proporcionó datos suficientes sobre las distribuciones geográficas y simpatría entre estas especies, lo que hace aún más difícil sustentar la validez de ambos taxones o sus posibles hibridaciones. Aunque otros trabajos han incorporado marcadores moleculares para evaluar las relaciones filogenéticas entre de las especies B. aspery B. atrox[53], actualmente no existen secuencias de DNA mitocondrial disponibles en los repositorios genéticos oficiales que provean información sobre las especies B. ayerbei y B. rhombeatus propuestas por Folleco-Fernández[105].Por lo tanto, consideramos que las poblaciones distribuidas en el suroeste de Colombia (departamentos de Cauca y Nariño) pueden ser considerados como linajes sinónimos de Bothrops asper, hasta que un nuevo estudio provea evidencias robustas a partir de tamaño de muestra adecuado y con un riguroso abordaje empleando taxonomía integrativa [60,97].

Con el fin de evidenciar los vacíos de conocimiento sobre las relaciones históricas y la venómica de algunos linajes representativos dentro de las especies de víboras colombianas, presentamos como novedad un mapa de calor que asocia las relaciones filogenéticas de linajes del complejo B. asper-atroxy los proteomas publicados en las últimas dos décadas. Por lo tanto, la figura 2 muestra el resultado de una filogenia molecular construida a partir de secuencias parciales de dos genes mitocondriales (Citocromo b y NDH4; ver Apéndice). La topología recuperada incluye terminales para diferentes poblaciones y linajes distribuidas en Colombia y Brasil, así como también, se incluyen datos moleculares de las especies de Bothrocophias recientemente descritaspara Colombia [75]. Utilizamos tres terminales que representan tres localidades geográficas en Brasil, incluyendo también dos terminales que representan a dos linajes actualmente sinonimizadas para la especie B. atrox. Utilizamos datos de ocho grupos de familias de proteínas/toxinas que han sido reportadas en estudios venómicos, y realizamos la asociación de los porcentajes de las principales toxinas principales con las hipótesis filogenéticas y su distribución geográfica.

Nuestros resultados muestran que B. asperde Colombia presenta tres linajes, geográficamente definidos y bien soportados, que divergen genéticamente entre 2,5% y 4% entre sí. De forma similar, Bothrops atrox presenta cuatro linajes definidos geográficamente, pero con distancias y relaciones filogenéticas que aún requieren una mayor resolución y necesitan ser mejor establecidas (poblaciones al oeste de la Cordillera Oriental - Cundinamarca vs. poblaciones al este de la Cordillera Oriental - Meta, Vaupés y Caquetá). Además, los límites geográficos y taxonómicos con el linaje que históricamente tomó el nombre de B. isabelae siguen siendo un problema taxonómico por resolver. Por lo cual, consideramos que se requieren estudios futuros que ayuden a establecer con claridad si las poblaciones distribuidas en la vertiente oriental de la Cordillera Oriental y en algunas localidades de Venezuela, corresponden a un linaje derivado B. atroxo pueden ser asignado al taxón históricamente conocido como B. isabelae.

Figura 2. Mapa de calor usando datos de proteomas para algunas víboras colombianas relacionadas al complejo Bothropsasper-atrox. Los datos proteómicos están graficados sobre una filogenia molecular que usa una matriz de genes concatenados construida a partir del método de Máxima Verosimilitud (ML) (secuencias parciales de MT-ND4 y MT-CYB, producidas por [3, 50, 53, 63, 75, 94, 96] y por Cubides-Cubillos y colaboradores(datos aún no publicados). La inferencia filogenética recupera las especies y sus linajes más importantes (aquellos para los cuales hay información genética y proteómica disponible; ver información bibliográfica en la Sección 3 ). En la topología recuperada son señalados los nodos con soporte de bs > 90%. Informaciones abreviadas: linajes/poblaciones ( Caribe y Pacífico CR: Costa Rica; Caribe y Pacífico Col: Colombia; Pacífico Ecu: Ecuador; MV Col: Valle del Magdalena, Colombia; RR Br: Región de Roraima de Brasil; RO Br: Región de Rondonia de Brasil; Amazonia Br: región amazónica de Brasil; Amazonia Col: región amazónica de Colombia; LlanOrient Col: región de la Orinoquia de Colombia; y nombres de familias de proteínas: LAAO: L-aminoácido oxidasa ; CTL: lectina de tipo C/similar a lectina; BPP: péptido potenciador de bradiquinina; CRISP: proteína secretora rica en cisteína; nucleotidasa; factor de crecimiento nervioso.

Es importante señalar que el género hermano de Bothrops, género Bothrocophias, tiene sólo tres especies con datos genéticos y un único proteoma publicado (ver la sección 3 de este capítulo). Asimismo, no fueron incluidos en este análisis los proteomas de los linajes B. ayerbei y B. rhombeatus debido a la ausencia de datos genéticos disponibles. Finalmente, se señala aquí la ausencia de datos venómicos para dos linajes importantes dentro de B. asper(poblaciones de las regiones Caribe y Magdalena Medio).

De todos los diversos linajes de B. atrox descritos previamente en análisis filogenéticos, solo dos cuentan con proteomas para por lo menos una de las poblaciones que lo conforman (Piedemonte llanero, departamento del Meta; y región norte de Brasil, estado de Amazonas). En consecuencia, se hacen evidentes los significativos vacíos de conocimiento en torno a la composición de los venenos del complejo B. atrox, indicando que se requiere invertir grandes esfuerzos por caracterizar sus poblaciones distribuidas a lo largo de la vertiente oriental de la Cordillera Oriental (departamento de Boyacá), piedemonte amazónico colombiano (departamentos de Caquetá, Putumayo), así como las tierras bajas amazónicas (departamentos de Guainía, Guaviare, Vaupés y Amazonas. Asimismo, a la fecha no existe información sobre la composición de los venenos de las poblaciones de tierras altas de la vertiente oriental de la Cordillera Oriental identificadas como el linaje B. isabelae, las cuales representan un desafío para la compresión de víboras de montaña del género Bothrops. Es posible suponer que la composición de los venenos de estas poblaciones varíe significativamente a la observada al interior de las poblaciones B. atrox de tierras bajas, como respuesta funcional y adaptativa a los gradientes ecológicos relacionados con la altitud; empleando dinámicas evolutivas específicas, como, por ejemplo, la duplicación de genes. No obstante, esta y otras posibles hipótesis, deben ser puesta a prueba en futuros estudios.

La potencia en la actividad hemorrágica de los diferentes tipos de metaloproteinasas presentes en el veneno de vipéridos (SVMP), es uno de los factores importantes en las actividades biológica de los envenenamientos causados por las especies del género Bothrops. En general, su abundancia relativa está relacionada con síntomas como la hemorragia local y sistémica [43]. Nuestro análisis mostró que las especies/linajes con el mayor contenido de SVMP, se distribuyen tanto en regiones tropicales secas como húmedas. Además, la composición del veneno mostró una alta variabilidad dentro de linajes estrechamente relacionados, indicando una posible repuesta ecológica. Probablemente, la distribución y dispersión heterogénea de especies/linajes sea una posible causa de los efectos sinérgicos entre diferentes tipos de SVMP. De hecho, la hemorragia, que también contribuye a la mionecrosis [108], es uno de los síntomas más documentados en los accidentes ofídicos de todos los miembros del grupo de especies B. asper-atrox.

Las PLA2 , la segunda toxina más abundante en el veneno del complejo de especies B. asper-atrox, es responsable de la mionecrosis y está estrechamente relacionada con las funciones digestivas del veneno [109-110] (ver Capítulo 5). Esta toxina suele representar alrededor del 20-40% de la composición total del proteoma en las especies del complejo B. asper-atrox, pero muestra una variabilidad moderada. De hecho, la variabilidad en el porcentaje de PLA2 no parece estar relacionada con un clado, región o clima específico. Sin embargo, debido a los grandes vacíos de información, en futuros estudios este patrón podría cambiar o estar asociado a variables ecológicas como la disponibilidad de presas, pérdida de hábitat, o la presión antropogénica.

Las enzimas que imitan de manera incompleta la acción de la trombina, las serino proteasas (SVSP), constituyen el tercer grupo de toxinas más importante en los venenos de las especies del género Bothrops y ejercen una variedad de acciones sobre la hemostasia y los sistemas cinina y cinina-calicreína en las presas de estas serpientes [111,112]. Este grupo de toxinas muestran poca variación dentro de las especies/linajes del complejo de especies B. asper-atrox,y aparentemente no hay una relación clara con la topología recuperada de la filogenia molecular obtenida. De hecho, los reportes de accidentes ofídicos causados por vipéridos no informan sobre la variabilidad en síntomas como coagulopatías o inflamación debido a que estos son signos típicos del envenenamiento botrópico (ver Capítulo 9). Al parecer, evolutivamente esta es una característica intrínsecamente ligada a la acción sinérgica con otros componentes del veneno (ver Capítulo 5 y 9).

Patocos y Patoquillas : complejo de especies del género Porthidium

Las víboras conocidas en Colombia como Patocos o Patoquillas habitan en Centro y Suramérica en una amplia gama de hábitats tropicales. Se hipotetiza que su origen es Centroamericano, con una dispersión a lo largo de la costa del Pacífico durante la fase final del surgimiento del istmo panameño (hace 3,5 millones de años), e incluso después de su formación [63]. Esta dispersión podría relacionarse de manera positiva o negativa a la competencia interespecífica con otras especies de víboras como B. asper, la cual colonizó Suramérica antes del cierre del istmo de Panamá [2,53,63]. Las especies de Porthidium son serpientes terrestres de cuerpo corto que no superan los 100 cm de longitud [2,3,13,14,113].

Figura 3. Ilustraciones de la cabeza del complejo de especies Porthidium lansbergii -nasutum. (Superior): Cabeza en vista lateral de Porthidium lansbergii(INSV-SR-89) de Yondó, Antioquia, Colombia. (Inferior): Cabeza en vista lateral de Porthidium nasutum(QCAZR 15395) de Tundaloma Lodge, Durango, Ecuador. Ilustraciones de Óscar Ramírez.

Las especies de este género comparten patrones de coloración críptica y un canthus rostralis claramente pronunciado con una escama rostral proyecta hacia arriba (Figura 3). Estas adaptaciones en la forma de la cabeza y coloración son típicas de los depredadores de emboscada [2]. Desde la década de 1990, se han realizado revisiones de las relaciones filogenéticas entre las diferentes especies del género empleando caracteres morfológicos y algunos datos moleculares [6,50,104].

Actualmente, diversos estudios taxonómicos han revelado las relaciones evolutivas y sistemáticas entre las diferentes especies del género Porthidium, sustentando la validez taxonómica de nueve especies: P. dunni, P. hespere, P. ophryomegas, P. volnicacum y P. yucatanicum especies con una fuerte afinidad hacia las zonas áridas; y las especies P. nasutum, P. porrasi, P. lansbergii,y P. arcosae asociadas a bosques tropicales de tierras bajas [95]. La descripción de la especie Centroamérica P. porrasi[114], descrita a partir de un análisis de las poblaciones adyacentes de P. nasutumde Costa Rica, dio inició a la discusión sobre la diversidad filogenética dentro del género y la necesidad de analizar poblaciones distribuidas al norte de Suramérica [95].

En Colombia, P. nasutum[115] y P. lansbergii[116] son especies estrechamente relacionadas. Porthidium nasutumse distribuye desde México a través de los bosques húmedos, pasando por la ecorregión Chocó-Darién, la ecorregión biogeográfica chocoana, incluido Ecuador [2]. Por otro lado, P. lansbergii, se distribuye en los bosques secos del Istmo-Pacífico de Panamá, alcanzando la región del Chocó-Darién y extendiéndose sobre los bosques húmedos de Urabá, así como en los bosques secos tropicales del Caribe colombiano y el norte de Venezuela. Su distribución también abarca los bosques secos, premontanos y montanos de la cuenca del río Magdalena [2,117].

La mayoría de los estudios filogenéticos previos de P. nasutumy P. lansbergiise realizaron con base en muestras moleculares pequeñas, o de un único individuo proveniente de poblaciones geográficamente aisladas [117,118]. La complejidad taxonómica observada en Panamá y en las diversas poblaciones colombianas sugiere una investigación a gran escala. Por ejemplo, Castoe et al. [95] muestran que P. nasutumes un clado parafilético conformado por dos linajes genéticamente bien diferenciados en Costa Rica y Ecuador.

De forma similar, nuestra filogenia muestra que P. nasutumpresenta una diferenciación clara entre las poblaciones evaluadas recuperando tres linajes principales (Figura 4), de los cuales, el Clado 1 (Costa Rica) y el Clado 2 (Ecuador) coinciden con los resultados previos reportados por Castoe et al. [95], mientras que el Clado 3 agrupa poblaciones distribuidas al noreste de los Andes de Colombia. Sin embargo, en nuestro análisis filogenético el linaje representado por las poblaciones del centro-oriental de Antioquia se anidó dentro del clado que agrupa todos los linajes P. lansbergii. Curiosamente, dos décadas atrás, Cisneros-Heredia y Yánez-Muñoz [119] sugirieron que la población ecuatoriana (Clado 2) debería considerarse como una especie nueva, distinta de P. nasutumde Centroamérica. No obstante, nuestra filogenia no incluyó muestras de poblaciones chocoanas de P. nasutum(Región Pacífico en Colombia) y dePorthidium lansbergiide la cuenca alta del río Magdalena (departamento de Huila).

Por otro lado, nuestra filogenia molecular (Figura 4) muestra que Porthidium lansbergiiexhibe una amplia diversificación a través de diversas ecorregiones que abarcan rangos de elevación desde el nivel del mar hasta los 1.200 msnm. Los linajes colombianos conforman un grupo parafilético: se distinguen las poblaciones del Darién-Panamá de aquellas ubicadas en la ecorregión del Caribe colombiano, la cuenca del río Magdalena, y las poblaciones al oriente de Venezuela. Además, algunas secuencias genéticas asociadas con las dos subespecies de P. lansbergii(P. l. hutmanni y P. l. rozei), se agruparon en un clado politómico, indicando que, a partir de los marcadores moleculares disponibles, no es posible comprender las relaciones evolutivas entre las poblaciones de la costa Caribe, el valle del río Magdalena y las poblaciones del norte Venezuela. Este resultado es similar a lo reportado por De Arco-Rodríguez et al [118] para las poblaciones del caribe colombiano. Todo lo anterior sugiere, que es necesario invertir más esfuerzos para dilucidar las relaciones evolutivas entre el complejo de especies Porthidium nasutum-lansbergii, siendo necesario incluir a futuro muestras genéticas de las poblaciones del Pacifico colombiano y cuenca alta del río Magdalena.

Figura 4. Mapa de calor usando datos de proteomas para algunas víboras colombianas relacionadas al complejo Porthidium nasutum-lansbergii. Los datos proteómicos están graficados sobre una Filogenia molecular que usa una matriz de genes concatenados, construida a partir del método de Máxima Verosimilitud (ML) (secuencias parciales de MT-ND4 y MT-CYB, producidas por [95,114]y Cubides-Cubillos y colaboradores).La topología filogenética recupera las especies y sus linajes más importantes, y aquellos para los cuales hay información genética y proteómica disponible (ver información bibliográfica en la Sección 3). Adicionalmente se muestran los nodos con soporte bs>90%. Informaciones abreviadas: linajes/poblaciones (CR: Costa Rica; Ecu: Ecuador; EasternAntCol: Este del departamento de Antioquia, Colombia; Col Urabá: región de Urabá de Colombia; MV Col: Valle del río Magdalena, Colombia; Col Caribe: región caribeña de Colombia; Col LlanOrient: Región de la Orinoquia de Colombia; Darién Pan: Región del Darién de Panamá; IslMarg Ven: Isla Margarita de Venezuela); y nombres de familias de proteínas: ( SVMP : metaloproteinasa; PLA2: fosfolipasa A2; SVSP: serina proteinasa; LAAO: L-aminoácido oxidasa; CTL: lectina tipo C/similar a lectina; BPP: péptido potenciador de bradicinina; CRISP: cisteína- proteína secretora rica; unk: nucleotidasa; fosfodiesterasa; factor de crecimiento nervioso y/o compuestos no proteicos;

La composición del proteoma, o composición proteica del veneno, solo es conocida para unas pocas especies de del género Porthidium, a pesar de que todas son de importancia médica, y algunas como las especies presentes en Colombia, representan un porcentaje importante en la incidencia anual de los accidentes ofídicos reportados (ver Capítulo 9). Actualmente, solo una población de la especie P. lansbergiicuenta con una descripción proteómica de su veneno.

No obstante, el análisis de la relación de la filogenia molecular y los datos proteómicos para las especies de Porthidium, muestra que existen diferencias importantes entre los proteomas de estas dos especies hermanas. Sin embargo, debido el fragmentado conocimiento sobre la composición de sus venenos, no es posible proponer una explicación para la aparente variabilidad observada entre los linajes, ni sobre la concordancia entre linajes filogeográficos y ecorregiones. La variación en sus venenos se observa en las principales toxinas que lo componen: SVMP, PLA2 y SVSP. Estas toxinas varían entre los clados y regiones geográficas divergentes. No obstante, hace falta un muestreo mucho más robusto y completo, que incluya la mayoría de las poblaciones/linajes de las especies distribuidas en Colombia, para poder comprender con claridad la variación en sus venenos . De hecho, es posible considerar que en las poblaciones de P. nasutumy P. lansbergiipuedan existir diferentes procesos adaptativos que promueven aleatoriamente la explosión de diversos fenotipos en sus venenos, y que estos a su vez, se relacionen con la formación de linajes [188]. Estas hipótesis y especulaciones requieren estudios futuros que reduzcan significativamente la incertidumbre en torno a la evolución de los linajes de las especies del género Porthidium y su relación con la respuesta funcional de sus venenos.

Víboras gigantes colombianas: La serpiente cascabel suramericana y el verrugoso

La serpiente cascabel sudamericana Crotalus durissus(sensu lato) es una especie que se destaca entre sus congéneres del género Crotalus por su amplia distribución geográfica, un número significativo de accidentes ofídicos reportados, y por los síntomas de sus envenenamientos, como la parálisis neuromuscular, rabdomiólisis, lesión renal aguda y coagulopatía [120] (Ver Capítulo 5 y 9). Investigaciones recientes en el campo de la taxonomía y sistemática, documentan la diversidad de subespecies de la especie C. durissus[121]: C. d. durissus [11]; C. d. cascavella[9]; C. d. collilineatus[52]; C. d. cumanensis[122]; C. d. marojoensis [123]; C. d. maricelae [124]; C. d. ruruima [123]; C. d. terrificus[37]; and C. d. trigonicus [125]. Estos autores incluyen dos especies adicionales del norte de Suramérica, Crotalus unicolor [126] con una distribución geográfica restringida a Aruba, y Crotalus vegrandis[127] restringida a Venezuela, la cual previamente fue considerada como una subespecie de C. durissus(ver Figura 5 Superior).

Figura 5 . Ilustraciones de cabezas de las víboras gigantes colombianas. (Superior) Cabeza en vista lateral de Crotalus durissusdel municipio de El Paso, Cesar Colombia (INSZ 115). (Inferior) Cabeza en vista lateral de Lachesis mutade Mirití-Paraná, municipio de La Pedrera, Amazonas, Colombia (IAvH-R-8721). Ilustraciones de Óscar Ramírez.

Algunos taxónomos han comenzado a reconocer algunas subespecies como unidades taxonómicas operacionales o taxa a nivel de especies [128,129], Recientemente, el linaje de C. durissus(incluido C. vegrandis) fue recuperado filogenéticamente como el grupo hermano de C. simus (Cascabel centroamericana)[121]. Esto sugiere que la diversidad críptica en este grupo es el resultado de procesos de aislamiento geográfico. Sin embargo, la filogenia molecular publicada para el grupo C. durissusno contó con muestras de individuos de las regiones trasandina y cisandina de Colombia.

En Colombia, Crotalus durissusse distribuye la región transandina del país sobre las tierras bajas de la región Caribe, extendiéndose hasta el valle del Magdalena, teniendo poblaciones disyuntas en la cuenca media y alta del río Magdalena; en la región cisandina se distribuye las altillanuras bien drenadas del Orinoquia [2]. Se considera una especie de hábitos terrestres y habita predominantemente en zonas abiertas relativamente secas [130]. Esta serpiente de cascabel exhibe una notable flexibilidad ecológica permitiéndole estar activa, tanto dentro de los bosques sobre sus bordes, siendo comúnmente encontrada en zonas abiertas fuertemente antropizadas [130,131]. Aunque es una de las especies más venenosas de Colombia, y su vez, una de las más traficada ilegalmente [89], esta especie presenta profundos vacíos de conocimiento en torno a su historia natural, registros de su ocurrencia y evaluación de su estado de conservación [64] (ver Capítulo 1). El patrón de distribución disyunto de sus poblaciones dentro de la región transandina, así como entre las poblaciones cis y transandinas, sugiere que es muy probable que Crotalus durissusesté compuesta por más de un linaje evolutivo que han divergido por aislamiento geográfico y ecológico. Recientemente, se encontró que existe diferencias intraespecíficas significativas en la composición y actividades biológicas del veneno de Crotalus durissus entre las poblaciones distribuidas en la cuenca media del río Magdalena, el piedemonte llanero y la costa caribe colombiana (ver Capítulo 5).Estos resultados sugieren que es plausible la hipótesis que Crotalus durissus es un complejo de especies con múltiples linajes evolutivos que han divergido por aislamiento geográfico y ecológico. No obstante, se espera que futuros estudios filogenéticos ayuden a resolver estas incógnitas al incluir muestras representativas de todas las poblaciones colombianas, así como poblaciones distribuidas en ecosistemas del Brasil.

Dentro de la familia Viperidae, las serpientes del género Lachesis[12], comúnmente en Colombia conocidas como «Verrugosos», son las víboras más grandes conocidas a la fecha, llegando a medir más de 3,5 metros [2]. Las serpientes de este género son las únicas especies ovíparas entre todas las víboras de América [132]. Las especies del género Lachesis se pueden dividir entre linajes centroamericanos y sudamericanos, con una divergencia estimada entre 6 y 18 millones de años. La divergencia dentro de las especies centroamericanas parece haber ocurrido entre 4 y 11 millones de años, probablemente debido al levantamiento de la Cordillera de Talamanca; sin embargo, la diferenciación entre linajes sudamericanos se produjo sólo hace unos 800.000 a 300.000 años [48,133]. Particularmente, el surgimiento y estructuración de las tres cordilleras andinas en Colombia se ha propuesto como el mecanismo de aislamiento entreL. muta(restringida al Amazonas) y las especies de verrugosos centroamericanos (L. melanocephala y L. stenophrys), y L. acrochorda, la única especie de Lachesis que habita en la región transandina, distribuyéndose en los bosques húmedos del Pacífico sudamericano, región del Darién en Panamá, y cuenca media del río Magdalena.

Publicaciones recientes que sintetizan el conocimiento disponible sobre las especies del género Lachesis,resaltan la rareza de los verrugosos colombianos, indicando que sus registros conocidos son escasos, así como el número accidentes ofídicos registrados oficialmente [134] (ver Capítulo 1 y 9). De hecho, es sorprendente que anualmente se presente un bajo número de número de mordeduras ocasionados por están especies, teniendo en cuenta su gran tamaño (más de 3,5 metros [89]), así como su amplia distribución en el país, abarcando cuatro de las cinco ecorregiones colombianas.

Los aspectos mejor estudiados del género Lachesis son su sistemática y taxonomía. Es tos estudios han incluido múltiples líneas de evidencia (ADN, morfología hemipenial, el patrón de color y el conteo de escamas) para establecer los parentescos evolutivos y la delimitación de especies dentro del género. A pesar de esto, las poblaciones colombianas de las dos especies distribuidas en el país están pobremente representadas en estos estudios, o no han sido incluidas [134].

Es importante resaltar que en Colombia las especies de verrugosos L. acrochorda(Figura 5 Inferior) y L. muta,tienen distribuciones alopátricas. Lachesis acrochordase distribuye en el Pacífico colombiano, región del Urabá-Darién, y cuenca media del río Magdalena; mientras que las poblaciones de L. mutase distribuyen en las laderas orientales de la Cordillera Oriental y en la ecorregión amazónica [135].

El conocimiento sobre la composición y actividad biológica de los venenos de los verrugosos colombianos es muy limitado. La composición proteica del veneno de L. acrochordase conoce en poblaciones de la costa del Pacífico y la cuenca media del río Magdalena en Colombia, lo que permite apreciar que la conformación del veneno de Lachesis es aparentemente muy conservadora en todas las especies del género [136,137]. Sin embargo, en el futuro se publicarán algunos estudios de sistemática molecular y nuevos análisis venómicos entre poblaciones de L. acrochordadel suroeste, noreste y costa pacífica de Colombia, muestran que esta baja variabilidad es aparente (A.M. Franco-Vásquez comunicación personal 2024). Actualmente, no se cuenta con caracterizaciones proteómicas de los venenos de L. mutade poblaciones colombianas. En general, los registros distribución e información general de la biología de L. mutade las poblaciones colombinas es muy escaza o inexistente [138]. Por lo tanto, es prioritario caracterizar los venenos de los verrugosos de la Amazonía colombiana dada su importancia médica, así como evaluar la posible variabilidad en la composición y actividades biológicas de los venenos entre las poblaciones colombinas y brasileras.

Perspectivas sobre las víboras poco estudiadas en Colombia.

Los últimos 20 años de investigaciones herpetológicas nos han permitido esclarecer varios de los procesos biológicos importantes en las principales especies de víboras colombianas. Los vipéridos de los géneros Bothrocophias y Bothriechis representan uno de los grandes retos a ser abordados por los investigadores que emplean marcadores moleculares como herramientas para indagar las trayectorias evolutivas de estos grupos que presentan morfologías cripticas y distribuciones enigmáticas. La reciente descripción de dos nuevas especies de Bothrocophias para Colombia [75], señala la importancia de evaluar las poblaciones crípticas de algunas especies que históricamente presentan una amplia distribución geográfica en Suramérica (p. ej., B. microphthalmus).

De manera similar, la propuesta de nuevas especies de Bothriechis para Colombia abre un espacio para investigaciones más profundas sobre los venenos del único grupo de víboras arborícolas en Colombia [139]. Sin embargo, estos esfuerzos se vieron obstaculizados debido a las significativas inconsistencias en la delimitación de especies dentro de las poblaciones colombianas, así como por la evidencia débil y los linajes no respaldados propuestos por Arteaga et al. [139] (ver Capítulo 1). Recientemente, Reyes-Velasco [222] revaluó la propuesta taxonómica de Arteaga et al. [139], demostrando que estos autores interpretaron incorrectamente sus resultados. Las diferencias genéticas que ellos interpretaron como límites entre especies reflejan en su lugar variación clinal, no linajes independientes. Además, Reyes-Velasco concluye que dentro del complejo B. schlegelii, solo tres especies (B. nigroadspersus, B. schlegelii y B. supraciliaris) deben considerarse como válidas. El resto de los taxones propuestos Arteaga et al. [139], incluidos B. khwargi, B. klebbai, B. rahimi, B. rasikusumorum y B. torvus, no se sostienen bajo el análisis más riguroso presentado por Reyes-Velasco [222], y, por lo tanto, deben ser sinonimizadas con B. schlegelii. En consecuencia, coincidimos con las conclusiones de Reyes-Velasco [222] y recomendamos que las futuras publicaciones que traten con poblaciones colombianas de Bothriechis schlegelii se refieran a este como el complejo de especies B. schlegelii (ver Capítulo 1).

La tabla 1 resume los marcadores moleculares disponibles para las diferentes especies de víboras que habitan en Colombia, con los cuales se han construido las principales filogenias publicadas actualmente, y constituyen nuestra comprensión actual de los caminos evolutivos de las víboras colombianas. No obstante, varios taxones y poblaciones de víboras en Colombia están pobremente representadas o no han sido incluidas en estos análisis [63, 92, 93,101, 55]. Por tanto, el conocimiento y las relaciones evolutivas de las víboras colombianas es muy limitado.

Bothrops asperha sido la única especie colombiana que cuenta con amplio análisis genético [53,60], empleando genes como el citocromo b y NDH4. Esperamos que en los próximos años surjan los resultados de algunos proyectos en curso, que investigan las trayectorias evolutivas que explican la compleja historia filogenética de estas víboras colombianas como B. atrox, P. nasutum, P. lansbergiiy Crotalus durissus(Cubides-Cubillos et al; Vargas et al- manuscritoen prensa).

Tabla 1. Datos de marcadores moleculares publicados para víboras de Colombia y otros países de la región neotropical.

Especies	Citocromo b	NDH4	Genes nucleares	Microsatélites
Bothriechis schlegelii	+*	*	-	-
Bothrocophias hyoprora	+*	+*	-	-
Bothrocophias tulitoi	+	+	-	-
Bothrocophias myrringae	+	+	-	-
Bothrocophias myersi	-	-	-	-
Bothrocophias colombianus	-	-	-	-
Bothrops asper	+*	+*	*	-
Linaje B. rhombeatus	-	-	-	-
Linaje B. ayerbei	-	-	-	-
Bothrops atrox	+*	+*	+*	*
Bothrops bilineatus	+*	+*	*	-
Bothrops punctatus	-	-	-	-
Bothrops pulcher	-	-	-	-
Crotalus durissus	+*	+*	+*	-
Lachesis acrochorda	+*	+*	-	-
Lachesis muta	+*	+*	-	-
Porthidium lansbergii	+*	+*	*	-
Porthidium nasutum	+*	+*	*	-

3. Actividades biológicas y proteómica de los venenos de víboras colombianas

Desde una perspectiva evolutiva, la selección de toxinas específicas en los venenos de las serpientes parece haber sido un proceso limitado, que conllevó fijar un número reducido de familias de proteínas en el tiempo [140]. De hecho, la restringida variedad de familias proteicas aparentemente promovió una rápida evolución de numerosas funciones biológicas para hacer frente los requerimientos dietarios y estrategias de caza de las serpientes [141]. Es por ello, que los venenos son considerados como adaptaciones tróficas que facilitaron a las serpientes el poder capturar y someter a sus presas, respondiendo de forma específica al tipo de presa y su disponibilidad en el hábitat. Esto explica porque los venenos de las serpientes exhiben una variación significativa en su composición [142].

Es bien conocido que la composición del veneno de las serpientes presenta variaciones en todos los niveles taxonómicos (entre familias, géneros y especies), pero la comprensión de cómo son sus mecanismos de acción aun tema de investigación [143,144]. Para poder comprender los determinantes de esta variación se requiere realizar estudios enfocados en comprender los procesos evolutivos de adaptación, coevolución, teniendo como marco de referencia hipótesis filogenéticas y ecológicas que expliquen su relacionamiento evolutivo [110,145,146,144]. El poder comprender como varía la composición en los venenos tiene un impacto transcendental en las ciencias aplicadas y biomédicas, ya que ayudará significativamente al desarrollo de nuevos medicamentos, así como al mejoramiento y eficacia de lo antiofídicos desarrollados para atender el envenenamiento [111,147] (ver Capítulo 6 y 10).

Varios países de Suramérica presentan una alta prevalencia de accidente ofídicos del género Bothrops, los cuales se asocian con envenenamientos graves y potencialmente mortales (ver Capítulo 9). Esto ha llevado a la estigmatización de las restantes especies de víboras, así como de serpientes no venenosas con apariencia similar. Esta estigmatización ha resultado en la matanza deliberada por parte de diversas comunidades humanas a múltiples especies de serpientes en todo el continente. Particularmente, existe un rechazo generalizado hacia las especies del género Bothrops. No obstante, este rechazo no es infundado, debido a su amplia distribución en diversas zonas ecológicas en las que confluyen con las principales áreas agrícolas, así como su alta capacidad para provocar envenenamientos, estas víboras se encuentran entre las serpientes venenosas más peligrosas de las regiones tropicales de Centro y Suramérica. Particularmente en Colombia, el envenenamiento botrópico representa el 62% del total de los casos anuales [111,148] (ver Capítulo 9).

Actualmente, el estudio de los venenos emplea un enfoque multidisciplinario, que utiliza tecnologías "ómicas" como la genómica, transcriptómica, proteómica y, más recientemente, la metabolómica, logrando una mejor compresión de los componentes de los venenos, particularmente, aquellos con bajo peso molecular [149]. Estos campos de investigación han tenido un impacto significativo en la ciencia biomédica actual [150], al incorporar técnicas avanzadas en espectrometría de masas (MS) de alta resolución [151] y métodos de anotación de novo que emplean bases de datos que requieren cantidades mínimas de veneno [152]. Esto ha permitido la identificación de nuevas familias de toxinas, toxinas individuales, isoformas únicas y variantes de empalme, así como aminas, aminoácidos y alcaloides presentes en los venenos.

Más de cien especies de víboras neotropicales son reconocidas a nivel mundial [4]; y dada su amplia distribución, los envenenamientos causados por estas especies constituyen un evento de importancia médica con un impacto significativo en la salud pública, ya que causan más de 2,7 millones de accidentes ofídicos al año [108]. No obstante, los venenos de las serpientes, al mismo tiempo, son una fuente de materia prima para la adquisición de nuevos compuestos moleculares [153], que facilitan los diversos avances biotecnológicos en biología molecular y biomedicina (ver Capítulo 10).

Chippaux et al. [154] allanó el camino para el estudio de los venenos de serpientes, demostrando que estas intrincadas secreciones varían en múltiples dimensiones y están afectadas por diversos factores intrínsecos y extrínsecos [144]. Actualmente, la venómica provee múltiples modelos útiles para la compresión de la evolución de los genes [155,156]. En las siguientes secciones, presentamos una breve reseña sobre los estudios en venómica de las víboras colombianas. También discutimos los vacíos de conocimiento y perspectivas de investigación que consideramos deben abordarse en el futuro cercano.

3.1La complejidad del veneno: más que un arma de caza

El veneno de víbora contiene una mezcla compleja de proteínas y enzimas con diferentes actividades biológicas [157]. Su función principal es someter, predigerir y matar a la presa (ver Capítulo 5). El veneno como arma de cacería, permitió a las serpientes la transición de un mecanismo de sometimiento mecánico de la presa (inmovilización y constricción del cuerpo), a un mecanismo de sometimiento química (el uso de veneno) [158]. Así, el sistema de inoculación de veneno se convirtió en una característica principal de las serpientes avanzadas [159], así como un rasgo muy distintivo para comprender la evolución y ecología de varias especies de serpientes [141].

Estas mezclas complejas de proteínas son producidas por glándulas bucales especializadas que son homólogas a las glándulas salivales y de Duvernoy presentes en miembros de la superfamilia Colubroidea [157,160]. Estas toxinas se originaron a partir de eventos de duplicación de genes que codifican proteínas con funciones fisiológicas no tóxicas (cuyas proteínas resultantes son reclutadas por la glándula venenosa) pero que muestran una expresión selectiva en una estructura en particular [141,161] .

Con el tiempo, las proteínas codificadas por las glándulas venenosas fueron sometidas a presiones selectivas que dieron como resultado su modificación estructural y funcional, e incluso, la supresión de su expresión en la glándula [161]. Sin embargo, aún no se comprende muy bien cuales fueron los mecanismos que conllevaron a los cambios en los componentes estructurales y de expresión proteica de los genes; y conocemos parcialmente cómo se dio la duplicación de genes relacionados con el origen de las funciones originales de las diversas proteínas y toxinas. Por lo tanto, comprender el orden de estos eventos que explican el origen de cualquier proteína es un desafío aún por resolver [162].

Los venenos de serpientes presentan una gran variabilidad intraespecífica e interespecífica, en gran medida porque se trata de rasgos ecológicos que evolucionan dinámicamente. Hay varios factores que influyen en su síntesis, como la estacionalidad, la distribución geográfica (variación ecológica entre poblaciones), así como la variabilidad en la dieta intrínsecamente divergente entre el sexo y desarrollo ontogenético de los individuos [154,163,164]. Recientemente se ha sugerido que las actividades biológicas de algunos venenos son útiles a la hora de defenderse de los depredadores, entre los cuales el ser humano hace parte de esta interacción [165].

Por ejemplo, los venenos de tres linajes de cobras escupidoras tienen la capacidad de activar neuronas sensoriales en mamíferos, induciendo dolor [165]. De hecho, la divergencia de los clados de cobras escupidoras en África (6,7 millones de años) podría estar asociada con la evolución del bipedalismo y el desarrollo de cerebros más grandes en los homínidos [165], lo que sugiere que "escupir veneno" podría ser un mecanismo antipredatorio que evoluciono como respuesta a interacciones negativas con homínidos antiguos. En este sentido, las serpientes necesitaron producir grandes cantidades de veneno, lo que implícitamente haría difícil inferir si el veneno tiene un alto costo energético (en comparación con otros rasgos ecológicos). No obstante, esta premisa no se ha logrado poner a prueba, debido a la dificultad de establecer experimentalmente un diseño en el que se pueda controlar de forma adecuada el tamaño y tipo de presas, la modulación autónoma por parte de la serpiente en la producción, y propulsión de veneno, así como la de toxicidad optima de cada taxón para la generación de dolor o envenenamiento [166].

El accidente ofídico, es un evento circunstancial o provocado en el que una serpiente muerde a un humano [167]. Como resultado de este incidente, se genera una intoxicación debido a la inoculación de veneno dando lugar a un caso clínico considerado por la Organización Mundial de la Salud (OMS) como una de las enfermedades tropicales desatendidas más importantes (ver Capítulo 9). Desafortunadamente, los accidentes ofídicos ocurren con mayor frecuencia en los países en desarrollo, representando casi el 95% del total de casos de accidentes ofídicos reportados en todo el mundo [168]. Además, dado que estos accidentes son frecuentes en las comunidades rurales de bajos ingresos y con escaso acceso a los servicios de salud, hacer frente a estos envenenamientos es desafiante, debido bajo acceso a los antiofídicos y los altos costos en la movilidad de los accidentados [168,169] (ver Capítulo 6).

En perspectiva, los venenos son un rasgo que evoluciona rápidamente; se ha inferido que los factores ambientales pueden generar presiones adaptativas que modulan su variación funcional entre las especies. Al ser una característica adaptativa que se empleada tanto para alimentarse como para disuadir o defenderse de los posibles depredadores. Actualmente, el desarrollo de antiofídicos efectivos que neutralicen sus envenenamientos es un gran desafío, ya que estas terapias deben considerar la amplia variabilidad intraespecífica en la composición de los venenos. De hecho, investigaciones recientes que indagaron sobre la divergencia del contenido de crotamina en poblaciones Crotalusdurissus,advierten sobre la necesidad de desarrollar un antiofídicos logren neutralizar la amplia variabilidad de sus toxinas [170,171].

Uno de los principales sistemas diana de los venenos de algunas serpientes es el sistema nervioso de su presa o incluso de un posible depredador [172]. La presencia de neurotoxinas en estos venenos se atribuye a su capacidad de alterar el funcionamiento normal en la trasmisión de señales eléctricas del sistema nervioso central y/o periférico [173,174]. La alta especificidad y selectividad de las neurotoxinas de los venenos de las serpientes de cascabel se han utilizado ampliamente para estudiar la estructura y función de las neuronas del sistema nervioso central y elementos de su membrana celular implicados en la transmisión eléctrica de las señales [175]; que al sufrir alteraciones provocan diversas patologías neurológicas (p. ej., Parkinson y Alzheimer, véase Capítulo 10). Sin embargo, hoy en día el efecto de estas toxinas en el sistema nervioso periférico y algunos órganos específicos es aún campo de investigación por explorar [172]. Se espera que, en el corto plazo, los investigadores sigan adquiriendo conocimientos sobre la administración dirigida de fármacos derivados de toxinas de serpientes empleadas para el tratamiento de diversas afecciones nerviosas, tumores y enfermedades neurodegenerativas. Mientras tanto, numerosas investigaciones persisten en la búsqueda e identificación nuevos péptidos derivados de los venenos de serpientes, que ayuden a comprender la correlación entre la estructura y función que permita el desarrollo de nuevas terapias biomédicas (ver Capítulo 10).

En Colombia, la colonización histórica de los vipéridos de nuevos nichos ecológicos en diferentes ecosistemas montañosos, de tierras bajas secas o tropicales húmedos, contribuyó de forma significativa a la diversificación fenotípica de sus venenos. Este proceso se ejemplifica en las poblaciones colombinas de Crotalusdurissus en las que se observa una contrastante variación intraespecífica en la composición sus venenos[171]. No obstante, aún se requiere mayores esfuerzos de investigación para comprender las relaciones entre la composición de los venenos, su contexto ecológico y su vínculo con las transformaciones del hábitat por actividades humanas. Para ellos se requiere el desarrollar un marco conceptual más robusto que permita proponer hipótesis que expliquen la diferenciación o especificidad de los venenos en un contexto ecológico y evolutivo.

Comprender cómo han evolucionado estos venenos en relación con las interacciones interespecíficas con los humanos ayudaría a investigar el efecto antropogénico sobre las poblaciones naturales de víboras, así como a resolver algunas cuestiones relacionadas con la eficacia de los antivenenos. Nuestro propósito en este apartado fue explicar que los venenos de serpientes, antes de ser un componente biológico que desencadena un cuadro clínico complejo (ver Capítulo 9), son un arma letal de caza, modificada y seleccionada, a través del curso de la evolución de forma independiente en múltiples especies de serpientes. Este rasgo evolutivo les otorgó a las víboras uno de los más sofisticados medios para alimentarse y defenderse.

3.2. Estudios en proteómica en Colombia

A pesar de la gran diversidad vipéridos en Colombia, sólo nueve especies (40%) han sido objeto de estudios proteómicos, contando con al menos con una población caracterizada en todo su rango de distribución dentro del país (Tabla 2). Las proteínas presentes en estos venenos se clasifican entre siete a doce familias de proteínas. Generalmente, las toxinas de la familia PLA 2 son los componentes más abundantes identificados, seguidas por SVMP, SVSP y LAAO. Sin embargo, existen algunas excepciones. Por ejemplo, el veneno de C. durissusexhibe una concentración significativa de crotoxina (64,71%), siendo una toxina característica de las serpientes de cascabel suramericanas [170,176], pero con variación intraespecíficas entre las poblaciones colombianas; y la crotamina como una toxina específica para las poblaciones del Caribe [171].

Tabla 2 . Proteomas conocidos de las especies de vipéridos distribuidas en Colombia.

Toxinas	Bothrops atrox	Bothrops asper	Bothrops ayerbei**	Bothrops rhombeatus**	Bothrops punctatus	Porthidium lansbergii	Bothrocophias myersi	Lachesis acrochorda	Crotalus durissus
SVMP	48,5	33.2	53,7	39,7	41,4	35,5	21,5	23,2	3,3
PLA 2	24,1	31,3	0,7	23	9,3	16,2	54,1	2,3	0,58
SVSP	10,9	3,89	9.3	4,9	5,4	4,5	3.4	35,1	6,33
LAAO	4,7	3	3.3	2,1	3,1	3,6	1,10	9,6	3,16
Hya	*	*	*	*	*	*	0,01	*	*
crotoxina	*	*	*	*	*	*	*	*	64,71
CRISP	2,6	1,45	1,1	0,7	1,2	1,4	*	0,9	1,27
Dis	1,7	3,27	2,3	4	3,8	12,9	0,62	*	13,7
PLB	*	*	*	*	*	0,7	0,37	*	*
PDE	*	*	0,7	0,2	*	0,3	0,08	*	*
CTL	7,1	8,54	10,1	3.1	16,7	6,7	0,56	6,9	1,18
VEGF	*	*	*	*	1,7	2,2	*	0,6	*
NGF	*	*	0.1	*	*	*	0,07	*	*
PNP	*	*	*	*	*	*	*	*	*
BPP	0,3	*	8,3	7	*	*	*	21,5	*
PEP	*	*	8,7	*	10,7	*	9, 1	*	*
Nuc	*	*	*	*	*	0,4	0,02	*	*
SVMPI	*	*	*	10	*	*	*	*	*
Crotamina	*	*	*	*	*	*	*	*	5,77

Hasta ahora, los venenos de las especies del género Bothrops presentan las mayores proporciones de SVMP que PLA2 . Este mismo patrón se observó en los venenos de P. lansbergii.y L. acrochorda.Por el contrario, el veneno de Bothrocophiasmyersitiene un mayor porcentaje de PLA2,y sus toxinas se agrupan en 12 familias proteicas, convirtiéndolo en el veneno más complejo entre todos los vipéridos con proteomas conocidos. De forma similar el veneno de L. acrochorda exhibe un perfil proteómico único al presentar elevadas proporciones de SVSP y BBP (35,1% y 25,5%), y un bajo porcentaje de PLA2. En contraste, el veneno de su especie hermana L. muta(Verrugoso amazónico) tiene la mayor cantidad de LAAO (9,6%) entre todos los proteomas de los vipéridos Colombinos.

Curiosamente, a pesar de que las de lectinas de tipo C han sido identificadas en todos los venenos de serpientes colombianas evaluadas, con porcentajes que oscilan entre 0,56% y 10,1%, en el veneno de B. punctatusestá toxina presenta un alto porcentaje en relación con sus congéneres (16,7%). De forma similar, el veneno de P. lansbergiiexhibe las mayores concentraciones de desintegrinas, mientras que estas toxinas no fueron detectadas en el veneno de L. acrochorda. La usencia o presencia de toxinas en los proteomas puede deberse múltiples factores, no obstante, un muy factor común es las limitaciones inherentes a las técnicas empleadas para detectar compuestos con bajas concentraciones. No obstante, estudios rigurosos han logrado detectar toxinas a muy bajas concentraciones. Por ejemplo, en el veneno de B. myersi,se logró detectar una cantidad mínima (0,01%) la presencia de hialuronidasas las cuales funcionan como un factor de propagación de los venenos (ver Capítulo 5). En promedio, en la mayoría de las investigaciones se describieron ocho grupos de toxinas o familias proteicas, de la cuales las SVMP, PLA2 s, SVSP, LAAO, CRISP, Dis, CTL y BPP está presente en todos los proteomas, la crotoxina y crotamina son componentes exclusivos del género Crotalus.

El veneno de Crotalus durissusrequiere especial atención por ser el único con actividad neurotóxica y miotoxinas a partir de toxinas de bajo peso molecular. El veneno de las cascabeles colombianas está compuesto por una proporción considerable de crotoxina (64,71%), responsable de inducir la parálisis flácida del diafragma. Sin embargo, otra toxina única de este veneno es la crotamina, un pequeño polipéptido básico con actividades miotóxicas y de penetración celular [177,178], la cual como ya lo indicamos anteriormente, varía geográficamente entre las poblaciones de esta especie [171,179].

3.3 Las actividades biológicas de las víboras colombianas

En general, todas las actividades del veneno analizadas para las víboras colombianas se correlacionan con los signos y síntomas observados en los accidentes ofídicos reportados (ver Capítulo 9). No obstante, al revisar los valores reportados previamente sobre su actividad letal (LD50 µg/ratones) se observa una notable variabilidad en las especies del género Bothrops (B. atrox, B. asper, B. ayerbei, B. rhombeatusy B. punctatus;Figura 6) que varía según en cada estudio: 81,4 (80,2–83,6) [42], 63 (rango 50–81 para varias ecorregiones de Colombia) [180], 50,1 (37,5–58,3) [181], 54,9 (36,0–83,8) [181] y 47 (36–61) [180]. Esto evidencia que existe una significativa variabilidad geográfica que no ha sido explicada o explorada previamente. Los venenos más letales entre las especies deBothropscaracterizadas hasta ahora son los de B. aspery B. punctatus. No obstante, esto podría cambiar en la medida que aumente el muestro y caracterización de los venenos de las poblaciones colombianas de las especies del género Bothrops . Entre todas las víboras del país, el veneno de C. durissuses el más letal con un promedio de 1 µg/ratón (0,02–2,5) [171,180]. La alta letalidad de esta especie es atribuye a la acción neurotoxicidad del veneno que rápidamente paraliza y causa asfixia a sus presas [182,183].

Saldarriaga et al. [42] llevaron a cabo uno de los estudios pioneros sobre la variabilidad ontogénica de los venenos de B. asper en Colombia. Este estudio permitió comprender cómo B. asper durante sus primeras etapas de vida, desarrollan venenos con fracciones dotadas de alta actividad hemorrágica, mientras que en la etapa adulta se producen mayoritariamente fracciones con actividad hemolítica. Además, en este estudio mostró que cuando se comparan los venenos de poblaciones de B. asperde Colombia y Costa Rica, existen divergencias específicas asociadas con variaciones en las actividades letales, hemorrágicas, edematogénicas, miotóxicas y hemolíticas.

Figura 6. Actividades biológicas de los venenos de especies de víbora colombiana.

De forma similar, en este estudio comparamos las actividades biológicas de las principales especies de víboras de importancia biológica de Colombia. Encontramos que dentro de los linajes de B. asper(B. asper, B. ayerbei yB. rhombeatus [184]) el veneno el linaje principal de B. asper(distribuido en toda la región del Caribe y el valle medio del río Magdalena) es significativamente más letal que los linajes de B. ayerbei yB. rhombeatus (Figura 6). El veneno deBothrops asper resultó ser más hemorrágico que el veneno del linaje deB. rhombeatus, pero la dosis mínima hemorrágica de B. ayerbeifue significativamente menor, mostrando su mayor capacidad para causar hemorragia.

Por otro lado, el veneno del linaje B. rhombeatus mostró una mayor capacidad coagulante mientras que el veneno de B. ayerbei exhibió la capacidad coagulante más baja. Además, a pesar del aislamiento geográfico entre las poblaciones de B. asperde la Isla de Gorgona (Océano Pacífico) y las poblaciones continentales del Valle del Cauca, lasactividades biológicas de sus venenosas mostraron actividades muy similares, con excepción de la actividad coagulante, la cual es mucho más baja en las poblaciones de la Isla Gorgona. Sin embargo, las actividades biológicas del veneno de estas dos poblaciones son significativamente diferente en comparación con los venenos de las poblaciones distribuidas en la costa Caribe y en la cuenca del río Magdalena [185]. Se ha inferido que la divergencia de poblaciones dentro de algunos linajes de B. asperestá fuertemente influenciada por la orografía de la cordillera de los Andes, así como por el cambio dinámico de sus ecosistemas que impulsa la especificidad los diferentes nichos ecológicos [ 184 ]. De hecho, al comparar los proteomas y la diversidad genética de los linajes de Bothrops asper, se observa variación intraespecífica en cuatro de los componentes principales del veneno [53,60]: SVMP, SVSP, PLA2 y CTL [184] (Figura 2).

Existe controversia sobre las actividades biológicas del veneno de varias poblaciones del complejo de especies Bothriechis schlegelii. Como los explicamos anteriormente, esta especie presenta una variación clinal entre sus poblaciones que posiblemente se relacionada con la variabilidad en las actividades biológicas de sus venenos (Figure 6A, C-E). Por ejemplo, las poblaciones colombianas del centro-este andino (departamento de Antioquia) [180,186] y las de la región suroeste de Colombia (departamento del Valle del Cauca) [187] no presentan actividad hemorrágica. Sin embargo, el veneno de esta estas poblaciones muestra actividad coagulante y una alta capacidad de formación de edema similar a lo observado en las poblaciones de Costa Rica (Bothriechis nigroadspersus) [188]. Dada la importancia médica de esta especie y su amplia distribución sobre las franjas de producción agrícola de los andes colombianos, es prioritario realizar estudios que exploren de forma rigurosa los determinantes en la variabilidad de las actividades biológicas del complejo de especies Bothriechis schlegelii. Esto permitirá a los médicos tratantes de los envenenamientos generar diagnósticos más acertados, establecer de forma oportuna y adecuada la terapia, y anticipar las posibles complicaciones clínicas.

La actividad hemorrágica de los venenos de serpientes se atribuye a la actividad de los SVMP [189]. La mayoría de los venenos de víboras colombianas caracterizados hasta ahora tienen actividad hemorrágica. Sin embargo, su potencia es variable. Generalmente, las especies de Bothrops spp., Porthidiumspp., L.acrochorda y Bothrocophiasspp.,son más hemorrágicos que el complejo de especies deB. schlegelii, mientras que C. durissusrara vez induce hemorragia local [190-193]; y el veneno de Bothrocophias campbelliinduce hemorragias leves y trastornos de la coagulación [194].

Porthidiumlansbergiiy P. nasutummuestran una actividad citotóxica moderada y una letalidad baja cuando se prueban en ratones, pero ambas especies muestran una alta actividad hemorrágica [195]. Además, los venenos del complejo Porthidium nasutum-lansbergiien Colombia inducen trastornos hemostáticos que se relacionan con su actividad procoagulante demostrada in vitro, su actividad fibrinogenolítica demostrada in vivo, y la alteración de los tiempos de coagulación. Estos venenos se caracterizan por un consumo masivo de fibrinógeno que sólo puede recuperarse mediante la aplicación de antiofídicos [90,193,196].

Tabla 3. Actividades biológicas evaluadas las víboras colombianas

Especies	Letalidad	Hemorrágico	Miotoxicidad	Edemático	Coagulante	Hemolítico (actividad PLA 2 )	Desfibrinogenante	Neurotóxico
Bothriechis schlegelii	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Ausente
Bothrocophias myersi	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	no evaluado	no evaluado	Ausente
Bothrops asper	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Ausente
Linaje B. ayerbei*	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Ausente
Linaje B. rhombeatus*	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Ausente
Bothrops atrox	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Ausente
Bothrops punctatus	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Ausente
Crotalus durissus	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente
Lachesis acrochorda	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Ausente
Lachesis muta	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Ausente
Porthidium lansbergii	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Ausente
Porthidium nasutum	Evaluado	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Presente	Ausente
Bothrocophias campbelli	No evaluado
Bothrocophias colombianus
Bothrocophias hyoprora
Bothrocophias myrringae
Bothrocophias tulitoi
Bothrops bilineatus
Bothrops oligobalius
Pulverizadora Bothrops
Bothrops taeniatus
Bothrops venezuelensis

3.4 Perspectivas de la investigación sobre antiofídicos

Los antiofídicos como terapia para la neutralización del envenenamiento causado por las mordeduras de serpientes se desarrollaron en el siglo XIX (ver Capítulo 6 y 7). A través de tiempo, esta terapia ha tenido grandes mejoras en la purificación y selección de inmunoglobulinas con alta capacidad neutralizante, estableciéndose como la terapia estándar y primordial para atender los botrópicos, y accidentes ofídicos en general alrededor del mundo [108,197]. Los antiofídico se elaboran a partir de anticuerpos o fragmentos de anticuerpos (inmunoglobulinas) que se unen específicamente a las toxinas del veneno, neutralizándolas y permitiendo su eliminación del organismo .

La administración de los antiofídicos es vía intravenosa. Al entrar al torrente sanguíneo los anticuerpos o fragmentos de anticuerpos se unen a las toxinas del veneno impidiendo que continúen dañando los tejidos o interfiriendo con funciones corporales críticas. Estas inmunoglobulinas son obtenidos y purificados del plasma de grandes mamíferos (generalmente caballos), que han sido previamente inmunizados con dosis subletales de veneno de serpiente [198,199] (ver Capítulo 6). Los antiofídicos puede ser monovalentes o polivalentes, dependiendo de si la inmunización de los caballos se realiza con veneno de una única especie, o con la mezcla de venenos de múltiples especies, respectivamente [200].

En algunos casos, esta terapia puede provocar reacciones adversas (p. ej., anafilaxia) [111], sin embargo, la incidencia y gravedad de estas reacciones asociadas con la administración de antiofídico se han reducido significativamente mediante la mejora técnica y tecnológica en la purificación de las inmunoglobulinas [201], lo que a su vez ha aumentado la eficacia terapéutica de los antiofídicos para detener las manifestaciones sistémicas de la ofidiotoxicosis [202]. Sin embargo, la heterogeneidad del veneno entre especies podría explicar las diferencias en los síntomas clínicos de los accidentes ofídicos registrados en diferentes regiones geográficas del país [154]. No obstante, no se cuentan con estudios que asocien de forma robusta la variabilidad de los síntomas clínicos observados en los accidentes ofídicos con la variabilidad geográfica de las actividades biológicas de los venenos y proteomas de las especies causantes del accidente. Actualmente, el desarrollo de nuevos enfoques de inmunoterapia para hacer frente al envenenamiento por serpientes en todas las regiones tropicales del mundo representa un enorme desafío [111].

Por ejemplo, las pruebas de neutralización del veneno de C. durissusutilizando el antiveneno del Instituto Nacional de Salud de Colombia (INS), empleadas para calcular la dosis efectiva mediana (DE50), han demostrado que se requiere más antiofídico para neutralizar el veneno de las poblaciones del Caribe (2,3 mg veneno/mL) que las de la cuenca media del Magdalena (1,4 mg veneno/mL), o la ecorregión de la Orinoquia (0,6 mg veneno/mL) [171]. Por lo tanto, existe la necesidad de utilizar venenos combinados como sustrato para producir antiofídicos y, así, priorizar la investigación del veneno de serpiente utilizando una combinación de herramientas proteómicas, toxicológicas y bioquímicas funcionales [199]. De hecho, Calvete et al [111] presentan un protocolo útil para investigar la inmunorreactividad antígeno-anticuerpo, abriendo una nueva puerta para el desarrollo de inmunoterapias que hacen frente a envenenamientos por venenos homólogos y heterólogos en diferentes especies de víboras.

Con base en la inmunorreactividad de las diversas toxinas frente a los antiofídicos, estos componentes tóxicos podrían agruparse en tres tipos de toxinas: completamente inmunodegradadas, parcialmente inmunodegradadas y no inmunodegradadas. Por tanto, los protocolos de inmunización deben mejorarse mediante el uso de mezclas de inmunógenos [111]. Este enfoque novedoso con un fundamento inmunológicamente sólido proporciona las bases para el desarrollo de antiofídicos mediante el uso de análisis inmunoquímicos y proteómicos para la neutralización de los venenos de las serpientes más relevantes desde el punto de vista médico en una región en específico [111].

Un primer ejemplo de este tipo de nuevas terapias es el desarrollo de un antiofídico para el tratamiento de las mordeduras causadas por Bothrops lanceolatus (víbora endémica de la isla de Martinica en las Antillas Menores de Martinica). Este producto, Sanofi-Pasteur Bothrofav®, ha demostrado buena eficacia preclínica en la neutralización, previniendo oportunamente el desarrollo de los eventos sistémicos más graves [203,204].

La limitada disponibilidad de antivenenos en varios países de Centro y Suramérica como resultado de diferentes procesos antropogénicos (sociales y ambientales; ver Capítulos 6) ha creado la necesidad y el desafío de mejorar la capacidad neutralizante de los antiofídicos disponibles. Para ello, se ha propuesto como alternativa el uso de inhibidores de pequeño tamaño molecular que contrarresten el efecto de las principales proteínas del veneno de serpiente que causan los síntomas clínicos. La investigación en este campo ha cobrado fuerza recientemente [144]. El efecto de estos inhibidores ha sido estudiado tanto in vitro como in vivo, obteniendo resultados prometedores para la inhibición de PLA2, SVMP y SVSP [205,206].

Investigadores del Instituto Clodomiro Picado dirigidos por el Dr. José María Gutiérrez realizaron estudios detallados a nivel proteómico de venenos de Bothrops caribbaeusy B. lanceolatus (especies incluidas dentro del complejo B. atrox), encontrando inmunorreactividad ante el antiofídico polivalente producido en Costa Rica para neutralizar el veneno de las serpientes de cascabel centroamericanas. Este antiofídico logró inmunodegradar el 80% de las proteínas y neutralizar las actividades letales de los venenos en estas dos especies [205]. Otras investigaciones reportan la importancia de comparar los proteomas entre especies con una historia natural similar, pero con incertidumbres taxonómicas o linajes no definidos dentro del complejo Bothrops asper-atrox[111,207,208]. Los hallazgos de los investigadores costarricenses aportan importante avance en la compresión de la actividad cruzada en los antiofídicos que contrarrestan los síntomas de envenenamiento causados por los vipéridos americanos.

En Colombia, se han realizado experimentos buscando opciones complementarias al tratamiento con antiofídicos. Recientemente, se han producido proteínas recombinantes para mejorar la inmunogenicidad de proteínas como el PLA2 y las toxinas de tres dedos (3FTx), lo cual representa un avance novedoso para el futuro en el desarrollo los antiofídicos que neutraliza las toxinas de las serpientes del género Micrurus[209]. Asimismo, se han realizado experimentos utilizando moléculas purificadas de extractos de plantas para inhibir ciertas actividades biológicas de los venenos de serpientes [192,210,211], así como inhibidores sintéticos que han mostrado actividad inhibidora contra PLA2 y SVMP [212], todos estos en pruebas preclínicas.

La incorporación gradual de técnicas cromatográficas y de espectrometría de masas para complementar las plataformas actuales recomendadas por la OMS en la evaluación de antivenenos, son ideales para establecer su validez clínica en un rango geográfico definido [213]. Además, cuando se combinan con ensayos de neutralización in vivo, los antiofídico representan un buen complemento para evaluar la eficacia terapéutica de los antiofídico contra los mismos venenos utilizados en su producción [214] .

Los antiofídicos polivalentes como el ICP (Costa Rica), INS (Colombia), PROBIOL (Colombia), UCV (Venezuela), BIOL (Argentina) y INS-PERÚ (Perú) pueden reconocer las principales familias de toxinas presentes en los venenos de Bothrops asper(SVMP, PLA2s, CRISP, SVSP, CTL); de estos el antiofídico del INS es la terapia más eficaz y segura [181]. Al realizar estudios comparativos entre los antiofídicos disponibles en Colombia, el antiofídico del INS muestra la capacidad de inmunoreconocimiento más efectiva, así como la mejor capacidad neutralizante de las actividades biológicas de los venenos de Bothrops ssp., Bothrocophias ssp., Bothriechis spp., Crotalusdurissus, Lachesis ssp., y Porthidium ssp., seguido por el antiofídico de Silanes (Bioclon) México [190]. En un estudio más reciente [185], se evaluaron venenos de B. asper de la Isla Gorgona y de las ecorregiones del Pacífico y occidente de Colombia, a partir de ensayos de inmunorreactividad utilizando antivenenos INS y Probiol. Los resultados obtenidos indican nuevamente que el antiveneno INS tuvo mayores títulos de anticuerpos y neutralización en comparación con el antiveneno Probiol, mostrando su mayor capacidad neutralizante para los venenos de B. asperde la población de la isla Gorgona.

Finalmente, es importante estudiar la variabilidad en la composición proteica de diferentes venenos de víbora y desarrollar estudios que describan las correlaciones estructura-función de toxinas individuales que ayudarán a mejorar la comprensión de los venenos como adaptaciones tróficas y defensivas en diferentes especies [213]. Asimismo, es importante continuar buscando alternativas para el posible uso de componentes del veneno como moléculas líderes para el desarrollo de nuevos medicamentos, no sin antes profundizar en algunos aspectos de la historia natural de otros géneros (p. ej., distribución) y analizar el impacto. sobre la destrucción de sus hábitats naturales y el cambio climático.

Apéndice: Material y métodos

Análisis filogenéticos

Los análisis filogenéticos se realizaron utilizando la estimación de máxima verosimilitud en el software IQ tree. [215]. Los modelos evolutivos se realizaron utilizando el buscador de modelos. [216]: TN+F+I: CYTB1_ND41, TIM+F+R2: CYTB2, GTR+F+I+G4: CYTB3_ND43, TN+F+R2: ND42. Los análisis se realizaron utilizando una matriz de 102 secuencias concatenadas para 51 terminales para el grupo Bothrops atrox y elgénero Porthidium distribuidos en Colombia, Brasil, Ecuador, Venezuela y Costa Rica. Se utilizaron 20 especies como grupo externo: Gloydius halys, Sistrurus miliarius y S. catenatus; Crotalus horridus, C. ruber, C. atrox y C. durissus; Agkistrodon piscivorus y A. contortrix; Mixcoatlus melanurus; Ophryacus ondulatus; Cerrophidion godmani; Metlapilcoatlus (Atropoides) nummifer y M. mexicanus ; Atropoides picadoi, Bothrocophias hyoprora, B. tulitoi,B. myrringae; Bothriechis nigroadspersus;y Bothrops jararaca. Además, se utilizó el software phytools para realizar un análisis de relaciones a nivel filogenético [217], utilizando dos proteomas publicados para especies de víboras colombianas y algunos linajes/clados relacionados.

Prueba de letalidad

Evaluamos la letalidad del veneno siguiendo los procedimientos y protocolos descritos por [200,218], así como el protocolo de producción MEN-R04.6022-011 del INS. Realizamos ensayos de dosis letales en animales de experimentación, observando sus tiempos de supervivencia, para determinar la dosis de veneno (μg/ratones) que causa el 50% de la muerte en la población de animales de experimentación en estudio (LD50). Las tasas de mortalidad de los animales de experimentación se estimaron siguiendo el método de Spearman-Karber [219].

Actividad coagulante

Realizamos pruebas de coagulación in vitro siguiendo los procedimientos y protocolos descritos por [200,220], así como el protocolo de producción MEN–R04.6031–001 del INS. Definimos como actividad coagulante positiva la dosis mínima de veneno (MCD µg/mL) que indujo la coagulación en plasma humano citratado.

Actividad desfibrinogenante

Realizamos pruebas de desfibrinogenación in vivo siguiendo los procedimientos y protocolos descritos por [200,220], así como el protocolo de producción MEN-R04.6022-046 del INS. Realizamos experimentos de desfibrinogenación en los animales de experimentación, observando el tiempo de coagulación de la sangre después de inocularlos por vía intravenosa con una dosis conocida de veneno. Se determinó como ensayo de actividad desfibrinogenante positiva la dosis mínima de veneno (MDD µg/ratones) que inducía la no coagulación de la sangre.

Actividad edemática

Realizamos pruebas de edema in vivo siguiendo los procedimientos y protocolos descritos por [200] así como el protocolo de producción MEN-R04.6022-046 del INS. En ensayos separados utilizando el veneno evaluado, se inocularon las patas derechas, mientras que las patas izquierdas se inocularon con volúmenes iguales de solución salina estéril (0,85%). Una hora más tarde, tras los procedimientos de inoculación y sacrificio de los animales, se cortaron ambas patas (cortando la articulación tibiotarsiana) y se pesaron. Se consideró que una diferencia de peso del 30% entre las patas indicaba la presencia de edema. Determinamos la actividad edematosa positiva como la dosis mínima de veneno (MED µg/ratones) que indujo un edema del 30%.

Actividad hemorrágica

Realizamos pruebas hemorrágicas in vivo siguiendo los procedimientos y protocolos descritos por [200,220], así como el protocolo de producción MEN-R04.6022-048 del INS. Inoculamos por vía subcutánea dosis conocidas de veneno en la línea media epigástrica de animales de experimentación en ensayos separados por especie de veneno. Todos los animales de experimentación fueron anestesiados previamente con ketamina. Como ensayos de control, inoculamos volúmenes iguales de solución salina estéril (0,85%) de la misma manera que los animales experimentales reactivos. Dos horas después de los procedimientos de inoculación, sacrificamos a los animales de experimentación utilizando CO2 como agente de eutanasia [221]. Luego, retiramos la piel del epigástrico, cortándola desde la articulación atlantooccipital hasta la base de la cola y girando con cuidado la piel del cuerpo hacia afuera. Finalmente, fotografiamos la piel hemorrágica evertida y extendida. Determinamos la actividad hemorrágica a la dosis mínima de veneno (MHD µg/ratones) que indujo un diámetro hemorrágico de 10 mm.

Cubides-Cubillos, S.D. Actitudes, Creencias y Prácticas Desarrolladas En Comunidades Rurales Del Urabá Antioqueño Con Relación a Las Serpientes y Su Mordedura. Trabajo presentado para optar al título de Magister en Educación – Línea de formación: pedagogía y diversidad cultural, Universidad de Antioquia: Medellín, Colombia, 2016.
Campbell, J.A.; Lamar, W. The Venomous Reptiles of the Western Hemisphere; Cornell University Press, Ed; Comstock Publishing: Ithaca, New York, 2004.
Alencar, L.R.V.; Quental, T.B.; Grazziotin, F.G.; Alfaro, M.L.; Martins, M.; Venzon, M.; Zaher, H. Diversification in Vipers: Phylogenetic Relationships, Time of Divergence and Shifts in Speciation Rates. Molecular Phylogenetics and Evolution 2016, 105, 50–62, doi:10.1016/j.ympev.2016.07.029.
Uetz, P.; Freed, P.; Aguilar, R.; Hošek, J. The Reptile Database. 2023.
Palisot de Beauvois Memoir on Amphibia. Serpents. Transactions of the American Philosophical Society1799, 4, 362–381.
Werman, S.D. Phylogenetic Relationships of Central and South American Pitvipers of the Genus Bothrops (Sensu Lato): Cladistic Analyses of Biochemical and Anatomical Characters. In Biology of the Pitvipers; J.A. Campbell, E.D. Brodie, Eds.; Selva: Texas, 1992; pp. 21–40.
Peters, W. Über Die von Hrn. Dr. Hoffmann in Costa Rica Gesammelten Und an Das Königl. Zoologische Museum gesandten Schlangen1859, 275–278.
Gutberlet, R.L.; Campbell, J.A. Generic Recognition for a Neglected Lineage of South American Pitvipers (Squamata: Viperidae: Crotalinae), with the Description of a New Species from the Colombian Chocó. American Museum Novitates 2001, 1–15.
Wagler, J. Serpentum Brasiliensium Species Novae, Ou Histoire Naturelle Des Espèces Nouvelles de Serpens. Jean de Spix, Animalia nova sive species novae1824, VII, 1–75.
Campbell, J.A.; Lamar, W.W. Taxonomic Status of Miscellaneous Neotropical Viperids, with the Description of a New Genus. Occasional Papers, Museum of Texas Tech University.1992, 153, 1–31.
Linnaeus, C. Systema Naturæ per Regna Tria Naturæ, Secundum Classes, Ordines, Genera, Species. Cum Characteribus, Differentiis, Synonymis, Locis; 10th ed.; 1758; Vol. 1.
Daudin, F.M. Histoire Naturelle, Générale et Particulière, Des Reptiles; F. Dufart.; Paris, 1802; Vol. 4.
Campbell, J.D.; Frost, R.; and Castoe, T.A. A new generic name for jumping pitvipers (Serpentes: Viperidae). Revista Latinoamericana de Herpetología 2019, 2, 52–53.
Jadin, R.C.; Gutberlet Jr, R.L.; Smith, E.N. Phylogeny, Evolutionary Morphology, and Hemipenis Descriptions of the Middle American Jumping Pitvipers (Serpentes: Crotalinae: Atropoides). Journal of Zoological Systematics and Evolutionary Research2010, 48, 360–365, doi:10.1111/j.1439-0469.2009.00559.x.
Cope, E.D. Catalogue of Batrachians and Reptiles [Batrachia and Reptilia] of Central America and Mexico. 1887, 32, 1–98.
Cope, E.D. “Ninth Contribution to the Herpetology of Tropical America.” Proceedings of the Academy of Natural Sciences of Philadelphia1871, 23, 200–224.
Garman, S. The Reptiles and Batrachians of North America. Memoirs of the Museum of Comparative Zoölogy, Cambridge (Massachusetts) 1884, 8, 34–185.
Cope, E.D. «Notes upon Some REPTILES of the Old World». Proceedings of the Academy of Natural Science of Philadelphia.1862, 14, 337–344.
Boulenger, G.A. “An Account of the Reptilia Obtained in Burma, North of Tenasserim, by Monsieur. L. Fea, of the Genoa Civic Museum.” Annali del Museo Civico di Storia Naturale di Genova1888, 6, 593–604.
Gray, J.E. Monographic Synopsis of the Vipers, or the Family Viperidæ. Zoological Miscellany, London1842, 2, 68–71.
Cope, E.D. Catalogue of the Venomous Serpents in the Museum of the Academy of Natural Sciences of Philadelphia, with Notes on the Families, Genera and Species. Proceedings of the Academy of Natural Sciences of Philadelphia1860, 11, 332–347.
Wagler, J.G. Natürliches System Der Amphibien, Mit Vorangehender Classification Der Säugetiere Und Vögel. Ein Beitrag zur vergleichenden Zoologie1830, 1–352.
Kuhl, K.; Van Hasselt, J.C. Uittreksel Uit de Brieven van Heeren Kuhl En van Hasselt, Aan de Heeren C.J. Temminck, Th. van Swinderen En W. de Haan. Algemeene Konst. Letterbode1822, 7, 99–104.
Gloyd, H.K. “A New Generic Name for the Hundred-Pace Viper.” Proceedings of the Biological Society of Washington1979, 91, 963–964.
Merrem, B. Versuch Eines Systems Der Amphibien. Tentamen Systematis Amphibiorum. Marburg: J.C. Krieger1820, 191.
Alcoock, A., F.F. “An Account of the Reptilia Collected by Dr. F. P. Maynard, Captain A. H. McMahon, C.I.E., and the Members of the Afghan-Baluch Boundary Commission of 1896.” Journal of the Asiatic Society of Bengal 1897, 65, 550–556.
Malhotra, A.; Thorpe, R.S. A Phylogeny of Four Mitochondrial Gene Regions Suggests a Revised Taxonomy for Asian Pitvipers (Trimeresurus and Ovophis). Molecular Phylogenetics and Evolution 2004, 32, 83–100, doi:10.1016/j.ympev.2004.02.008.
Hoge, A.R.; Romano-Hoge, S.A.R. Poisonous Snakes of the World. Part 1: Check List of the Pitvipers, Viperoidea, Viperidae, Crotalinae. Memorias do Instituto Butantan1981, 42, 179–309.
Fitzinger, L. Systema Reptilium. Fasciculus Primus: Amblyglossae. Vindobonae: Braumüller und Seidel1843, 1–106.
Reuss, A.F. Sechs Europaïsche Giftschlangengattungen. Zoologischer Anzeiger 1927, 75, 124–129.
Broadley, D.G. A Review of the Tribe Atherini (Serpentes: Viperidae), with Descriptions of Two New Genera. African Journal of Herpetology 1996, 45, 40–48.
Nilson, G., T.B., A.C., O.N., J.U.& H.H.W. Taxonomic Position of the Vipera xanthina Complex. Kaupia1999, 8, 99–102.
McDiarmid, R.W., C.J.A., T.T. Snake Species of the World: A Taxonomic and Geographic Reference. Herpetologists’ League1999, 1, 511.
Hoge A.R.; Romano-Hoge S.A.L. «Notes on Micro and Ultrastructure of ‘Oberhäutschen’ in Viperoidea. Viperoidea, Viperidae, Crotalinae». Memorias do Instituto Butantan1983, 44, 81–118.
Boulenger, G.A. Catalogue of the Snakes in the British Museum (Natural History. Volume III., Containing the ... Viperidæ. London: Trustees of the British Museum (Natural History). (Taylor and Francis, printers)1896, 3, 772.
Lacepede, B.G.E.L. Memoire Sur Plusieurs Animaux de La Nouvelle Hollande Dont La Description n’a Pas Encore Ete Publiee. Annales du Museum d’Histoire naturelle1804, 4, 184–211.
Laurenti, J. Specimen Medicus Exhibens Synopsin Reptilium. J. Thoma (Vienna) 1768, 1–2.
Wüster, W.; Peppin, L.; Pook, C.E.; Walker, D.E. A Nesting of Vipers: Phylogeny and Historical Biogeography of the Viperidae (Squamata: Serpentes). Molecular Phylogenetics and Evolution 2008, 49, 445–459, doi:10.1016/j.ympev.2008.08.019.
Greene, H. The Ecological and Behavioral Context for Pitviper Evolution. In Biology of the Pitvipers; 1992; pp. 107–117.
Mackessy, S. Venom Ontogeny in the Pacific Rattlesnakes Crotalus viridis helleri and C. d. oreganus. Copeia1988, 2, 92–101.
Guércio, R.A.P.; Shevchenko, A.; Shevchenko, A.; López-Lozano, J.L.; Paba, J.; Sousa, M. V.; Ricart, C.A.O. Ontogenetic Variations in the Venom Proteome of the Amazonian Snake Bothrops atrox. Proteome Science 2006, 4, doi:10.1186/1477-5956-4-11.
Saldarriaga, M.M.; Otero, R.; Núñez, V.; Toro, M.F.; Dı́az, A.; Gutiérrez, J.M. Ontogenetic Variability of Bothrops atrox and Bothrops asper Snake Venoms from Colombia. Toxicon2003, 42, 405–411, doi:10.1016/S0041-0101(03)00171-5.
Alape-Girón, A.; Sanz, L.; Escolano, J.; Flores-Díaz, M.; Madrigal, M.; Sasa, M.; Calvete, J.J. Snake Venomics of the Lancehead Pitviper Bothrops Asper. Geographic, Individual, and Ontogenetic Variations. Journal of Proteome Research 2008, 7, 3556–3571, doi:10.1021/pr800332p.
Kardong, K.; Kiene, T.; Bels, V. Evolution of Trophic Systems in Squamates. Neth Journal Zoology 1997, 47, 1–17.
BURGER, W.L. Genera of Pitvipers (Serpentes: Crotalidae), University of Kansas: Lawrence, 1971.
Avise, J.C. Molecular Markers, Natural History and Evolution; Springer US, 1994.
AVISE, J.C. Phylogeography; Harvard University Press, 2000; ISBN 9780674268708.
Zamudio, K.R.; Greene, H.W.; Zamudio, K.R.; Greene, H.W. Phylogeography of the Bushmaster (Lachesis Muta: Viperidae): Implications for Neotropical Biogeography. Systematics and Conservation; 1997; Vol. 62.
Thorpe, R.S.; Mcgregor, D.P.; Cumming, A.M.; Jordan, W.C. DNA Evolution and Colonization Sequence of Island Lizards in Relation to Geological History: MtDNA RFLP, Cytochrome b, Cytochrome Oxidase, 12s RRNA Sequence, and RAPD Nuclear Analysis. Evolution (NY) 1994, 48, 230–240.
Parkinson, C.L. Molecular Systematics and Biogeographical History of Pitvipers as Determined by Mitochondrial Ribosomal DNA Sequences. Copeia1999, 576–586.
Gutberlet Jr, R.L.; Harvey, M.B. Phylogenetic Relationships of New World Pit Vipers as Inferred from Anatomical Evidence. In Biology of the Vipers; G.W. Schuett, M. Höggren, M.E. Douglas, H.W. Greene, Eds.; Eagle Mountain Publishing: Salta Lake City, 2002; Vol. 1, pp. 51–68.
Amaral, A. Contribuicao ao conhecimento dos ofidios neotropicos XXXVI. Redescricao da espécie Bothrops hyoprora Amaral, 1935. Mem. Inst. Butantan 26: 221-225.
Saldarriaga-Córdoba, M.; Parkinson, C.L.; Daza, J.M.; Wüster, W.; Sasa, M. Phylogeography of the Central American Lancehead Bothrops asper (SERPENTES: VIPERIDAE). PLoS One2017, 12, e0187969, doi:10.1371/journal.pone.0187969.
Gregory-Wodzicki, K.M. Uplift History of the Central and Northern Andes: A Review. Bulletin of the Geological Society of America2000, 112, 1091–1105, doi:10.1130/0016-7606(2000)112<1091:UHOTCA>2.3.CO;2.
Carrasco, P.A.; Mattoni, C.I.; Leynaud, G.C.; Scrocchi, G.J. Morphology, Phylogeny and Taxonomy of South American Bothropoid Pitvipers (Serpentes, Viperidae). Zoologica Scripta 2012, 41, 109–124, doi:10.1111/j.1463-6409.2011.00511.x.
Bagley, J.C.; Johnson, J.B. Phylogeography and Biogeography of the Lower Central American Neotropics: Diversification between Two Continents and between Two Seas. Biological Reviews2014, 89, 767–790, doi:10.1111/brv.12076.
Carrasco, P.A.; Koch, C.; Grazziotin, F.G.; Venegas, P.J.; Chaparro, J.C.; Scrocchi, G.J.; Salazar‐Valenzuela, D.; Leynaud, G.C.; Mattoni, C.I. Total‐evidence Phylogeny and Evolutionary Morphology of New World Pitvipers (Serpentes: Viperidae: Crotalinae). Cladistics2023, 39, 71–100, doi:10.1111/cla.12522.
Antonelli, A.; Quijada, A.; Crawford, A.J.; Bates, J.M. Molecular Studies and Phylogeography of Amazonian Tetrapods and Their Relation to Geological and Climatic Models Origin, Evolution, Genetics and Selective Drivers of Snake Venom Evolution. View Project Population Genetics and Molecular Ecology of Ectothermic Vertebrates2010.
Lagomarsino, L.P.; Condamine, F.L.; Antonelli, A.; Mulch, A.; Davis, C.C. The Abiotic and Biotic Drivers of Rapid Diversification in Andean Bellflowers (Campanulaceae). New Phytologist2016, 210, 1430–1442, doi:10.1111/nph.13920.
Salazar‐Valenzuela, D.; Kuch, U.; Torres‐Carvajal, O.; Valencia, J.H.; Gibbs, H.L. Divergence of Tropical Pitvipers Promoted by Independent Colonization Events of Dry Montane Andean Habitats. Journal of Biogeography2019, 46, 1826–1840, doi:10.1111/jbi.13661.
Solís-Lemus, C.; Ané, C. Inferring Phylogenetic Networks with Maximum Pseudolikelihood under Incomplete Lineage Sorting. PLoS Genetics2016, 12, doi:10.1371/journal.pgen.1005896.
Sousa, V.; Hey, J. Understanding the Origin of Species with Genome-Scale Data: Modelling Gene Flow. Nature Reviews Genetics 2013, 14, 404–414, doi:10.1038/nrg3446.
Wüster, W.; Salomão, M.; Quijada–Mascareñas, J.A.; Thorpe, R.; BBBSP Origins and Evolution of the South American Pitviper Fauna: Evidence from Mitochondrial DNA Sequence Analysis. In Proceedings of the Biology of the Vipers; Campbell, J.A., Brodie, E.D., Schuett, G.W., Hoggren, M., Douglas, M.E., Greene, H.W., Eds.; Eagle Mountain Publishing: UT, USA, 2002; pp. 111–128.
Díaz-Ricaurte, J.; Cubides-Cubillos, S.D.; Ferreto Fiorillo, B. Bothrops asper (Garman, 1884). Catálogo de Anfibios y Reptiles de Colombia2018, 4, 4–22.
Cubides-Cubillos, S.D.; Loaiza-López, F.; Molina-Betancourt, J. Porthidium Nasutum (Bocourt, 1868). Catalogo de Anfibios y Reptiles de Colombia2021, 7, 64–73.
Molina-Betancourth, J.; Loaiza-López, F.; Cubides-Cubillos, S.D. Porthidium Lansbergii (Schlegel, 1841). Catalogo de Anfibios y Reptiles de Colombia2021, 7, 51–63.
Gutenkunst, R.N.; Hernandez, R.D.; Williamson, S.H.; Bustamante, C.D. Inferring the Joint Demographic History of Multiple Populations from Multidimensional SNP Frequency Data. PLoS Genetics2009, 5, doi:10.1371/journal.pgen.1000695.
Pickrell, J.K.; Pritchard, J.K. Inference of Population Splits and Mixtures from Genome-Wide Allele Frequency Data. PLoS Genetics2012, 8, doi:10.1371/journal.pgen.1002967.
Rittmeyer, E.N.; Austin, C.C. Combined Next-Generation Sequencing and Morphology Reveal Fine-Scale Speciation in Crocodile Skinks (Squamata: Scincidae: Tribolonotus). Molecular Ecology2015, 24, 466–483, doi:10.1111/mec.13030.
Leaché, A.D.; Banbury, B.L.; Felsenstein, J.; De Oca, A.N.M.; Stamatakis, A. Short Tree, Long Tree, Right Tree, Wrong Tree: New Acquisition Bias Corrections for Inferring SNP Phylogenies. Systematic Biology 2015, 64, 1032–1047, doi:10.1093/sysbio/syv053.
McCormack, B.; Rycroft-Malone, J.; DeCorby, K.; Hutchinson, A.M.; Bucknall, T.; Kent, B.; Schultz, A.; Snelgrove-Clarke, E.; Stetler, C.; Titler, M.; et al. A Realist Review of Interventions and Strategies to Promote Evidence-Informed Healthcare: A Focus on Change Agency. Implementation Science2013, 8, doi:10.1186/1748-5908-8-8-107.
Pyron, R.A.; Costa, G.C.; Patten, M.A.; Burbrink, F.T. Phylogenetic Niche Conservatism and the Evolutionary Basis of Ecological Speciation. Biological Reviews2015, 90, 1248–1262, doi:10.1111/brv.12154.
Shanker, K.; Vijayakumar, S.P.; Ganeshaiah, K.N. Unpacking the Species Conundrum: Philosophy, Practice and a Way Forward. Journal of Genetics 2017, 96, 413–430, doi:10.1007/s12041-017-0800-0.
Mallik, A.K.; Srikanthan, A.N.; Ganesh, S.R.; Vijayakumar, S.P.; Campbell, P.D.; Malhotra, A.; Shanker, K. Resolving Pitfalls in Pit Viper Systematics - A Multi-Criteria Approach to Species Delimitation in Pitvipers (Reptilia, Viperidae, Craspedocephalus) of Peninsular India Reveals Cryptic Diversity. Vertebrate Zoology2021, 71, 577–619, doi:10.3897/vz.71.e66239.
Angarita-Sierra, T.; Cubides-Cubillos, S.D.; Hurtado-Gómez, J.P. Hidden in the Highs: Two New Species of the Enigmatic Toadheaded Pitvipers of the Genus Bothrocophias. Vertebrate Zoology2022, 72, 971–996, doi:10.3897/vz.72.e87313.
Haffer, J. Speciation in Amazonian Forest Birds. Science1969, 165, 131–137.
Fjelds, J. Geographical Patterns for Relict and Young Species of Birds in Africa and South America and Implications for Conservation Priorities; 1994; Vol. 3.
Duellman, W.E. Global Distribution of Amphibians: Patterns, Conservation and Future Challenges. In Patterns of distribution of amphibians: A global perspective; Duellman, W.E., Ed.; John Hopkins University Press, 1999; pp. 1–30.
Myers, N.; Mittermeier2, R.A.; Mittermeier2, C.G.; Da Fonseca3, G.A.B.; Kent, J. Biodiversity Hotspots for Conservation Priorities; 2000; Vol. 403.
Brumfield, R.T.; Edwards, S. V. Evolution into and out of the Andes: a bayesian analysis of historical diversification in Thamnophilus antshrikes. Evolution (NY) 2007, 61, 346–367, doi:10.1111/j.1558-5646.2007.00039.x.
Coates, A.; Obando, J. “The Geologic Evolution of the Central American Isthmus.” In Evolution and Environment in Tropical America; Jackson, J., Budd, A., Coates, A., Eds.; The University of Chicago Press: Chicago, 1996; pp. 21–56.
Harvey, M.G.; Brumfield, R.T. Genomic Variation in a Widespread Neotropical Bird (Xenops Minutus) Reveals Divergence, Population Expansion, and Gene Flow. Molecular Phylogenetics and Evolution2015, 83, 305–316.
Burbrink, F.T.; Castoe, T. Molecular Phylogeography of Snakes Rattlesnake Phylogeonomics and Morphology in MX: Crotalus atrox and Crotalus scutulatus. View Project; 2009.
Mason-Gamer, R.J.; Kellogg, E.A. Testing for phylogenetic conflict among molecular data sets in the tribe Triticeae (Gramineae); 1996; Vol. 45.
van Veller, M.G.P.; Zandee, M.; Kornet, D.J. Two Requirements for Obtaining Valid Common Patterns under Assumptions Zero, 1 and 2 in Vicariance Biogeography. Cladistics1999, 15, 393–406.
Crisci, J. V.; Katinas, L.; Posadas, P. Historical Bioegeography: An Introduction; Harvard University Press: Cambridge, 2003.
Guarnizo, C.E.; Amézquita, A.; Bermingham, E. The Relative Roles of Vicariance versus Elevational Gradients in the Genetic Differentiation of the High Andean Tree Frog, Dendropsophus labialis. Molecular Phylogenetics and Evolution2009, 50, 84–92, doi:10.1016/j.ympev.2008.10.005.
Martins, M.; Marques, O.; Sazima, I. Ecological and Phylogenetic Correlates of Feeding Habits in Neotropical Pitvipers of the Genus Bothrops. In Biology of the Vipers; G.W. Schuett, M. Hoggren, M.E. Douglas, H.W. Greene, Eds.; Eagle Mountain ¨ Publishing, 2002; pp. 307–328.
Lynch, J.D. El Contexto de Las Serpientes de Colombia Con Un Análisis de Las Amenazas En Contra de Su Conservación. Revista de la academia colombiana de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales2012, 36, 435–449.
Cañas-Dávila, C.A.; Castro-Herrera, F.; Castaño-Valencia, R.S. Serpientes Venenosas: Lecciones Aprendidas Desde Colombia; Tobón García, G.J., Osorno Reyes, J., Cañas Dávila, C.A., Castro Herrera, F., Castaño Valencia, R.S., Eugenia Rebolled, V., Eds.; Fundación Valle del Lili: Cali, Colombia., 2016; Vol. 1.
Quiñones-Betancourt, E.; Díaz-Ricaurte, Juan.; Angarita-Sierra, Teddy.; Guevara- Molina, C.; Díaz-Morales, R. Bothrops Atrox (Linnaeus, 1758). Catálogo de Anfibios y Reptiles de Colombia2018, 4, 7–23.
Salomão, M.G.; Wüster, W.; Thorpe, R.S. MtDNA Phylogeny of Neotropical Pitvipers of the Genus Bothrops (Squamata: Serpentes: Viperidae). Kaupia (Darmstadt)1999, 8, 127–134.
Wuster, W.; Salomao, M.G.; Duckett, D.; Thorpe, R.S. Systematics of the Bothrops atrox Complex: New Insights from Multivariate Analysis and Mitochondrial DNA Sequence Information. Symposia of the Zoological Society of London 1997, 70, 99–113.
Castoe, T.A.; Parkinson, C.L. Bayesian Mixed Models and the Phylogeny of Pitvipers (Viperidae: Serpentes). Molecular Phylogenetics and Evolution2006, 39, 91–110, doi:10.1016/j.ympev.2005.12.014.
Castoe, T.A.; Sasa, M.M.; Parkinson, C.L. Modeling Nucleotide Evolution at the Mesoscale: The Phylogeny of the Neotropical Pitvipers of the Porthidium Group (Viperidae: Crotalinae). Molecular Phylogenetics and Evolution2005, 37, 881–898, doi:10.1016/j.ympev.2005.05.013.
Parkinson, C.L.; Zamudio, K.R.; Greene, H.W. Phylogeography of the Pitviper Clade Agkistrodon: Historical Ecology, Species Status, and Conservation of Cantils. Molecular Ecology2000, 9, 411–420.
Gibbs, H.L.; Sovic, M.; Amazonas, D.; Chalkidis, H.; Salazar-Valenzuela, D.; Moura-Da-Silva, A.M. Recent Lineage Diversification in a Venomous Snake through Dispersal across the Amazon River. Biological Journal of the Linnean Society2018, 123, 651–665, doi:10.1093/biolinnean/blx158.
Sandner-Montilla, F. Una Nueva Especie de Genero Bothrops (Serpentes, Crotalidae, Bothropinae) de La Region de Guanare, Estado Portuguesa, Venezuela. Memorias cientifica de ofidiologia1979, 4, 1–19.
Hallowell, E. Descriptions of Reptiles from South America, Supposed to Be New. Proceedings of the Academy of Natural Sciences of Philadelphia1845, 2, 241–247.
Markezich, A.L.; Taphorn, D.C. A Variational Analysis of Populations of Bothrops (Serpentes: Viperidae) from Western Venezuela. Journal of Herpetology 1993, 27, 248–254.
Fenwick, A.M.; Gutberlet Jr, R.L.; Evans, J.A.; Parkinson, C.L. Morphological and Molecular Evidence for Phylogeny and Classification of South American Pitvipers, Genera Bothrops, Bothriopsis, and Bothrocophias (Serpentes: Viperidae). Zoological Journal of the Linnean Society2009; 156(3):617 – 640. DOI:10.1111/j.1096-3642.2008.00495.x
de Queiroz, K. “The General Lineage Concept of Species, Species Criteria, and the Process of Speciation.” In book: Endless Forms: Species and Speciation1998, 57–75.
Nascimento, D. dos S. Filogenia Molecular de Serpentes Neotropicais Do Grupo Bothrops atrox (Linnaeus, 1758) (Viperidae: Crotalinae). Tese de doutorado; 2014.
Parkinson, C.L.; Campbell, J.A.; Chippindale, P. Multigene Phylogenetic Analyses of Pitviper Relationships, with Comments on Their Biogeography. In Biology of the Vipers; G.W. Schuett, M. Höggren, H.W. Greene, Eds.; Biological Sciences Press, Traverse City, 2002; pp. 3–110.
Folleco-Fernández, A.J. Taxonomía del complejo Bothrops asper (serpentes: viperidæ) en el sudoeste de Colombia. Revalidación de la especie Bothrops rhombeatus (García 1896) y descripción de una nueva especie. Revista Novedades Colombianas2010, 10, 33–70.
Ramírez-Chaves, H.E.; S.S. Bothrops ayerbei Folleco-Fernández, 2010 y Bothrops rhomboatus García, 1896 (Serpentes: Viperidae) Son Un Nombre No Disponible y Un Nomen Dubium, Respectivamente. Boletín Científico Centro de Museos Museo de Historia Natural, Universidad del Caldas 2104, 18, 138–141.
Garcia, E. Los Ofidios Venenosos Del Cauca. Métodos Empíricos y Racionales Empleados Contra Los Accidentes Producidos Por La Mordedura de Esos Reptiles. Cali: Librería Colombiana1896, 102.
Gutiérrez, J.M.; Calvete, J.J.; Habib, A.G.; Harrison, R.A.; Williams, D.J.; Warrell, D.A. Snakebite Envenoming. Nature Reviews Disease Primers 2017, 3, doi:10.1038/NRDP.2017.63.
Gutiérrez, J.M. Comprendiendo Los Venenos de Serpientes: 50 Años de Investigaciones En América Latina; Revista de Biología Tropical2002; Vol. 50.
Daltry, J.C.; Wüster, W.; Thorpe, R.S. Diet and Snake Venom Evolution. Nature1996, 379, doi:10.1038/379537a0.
Calvete, J.J.; Sanz, L.; Angulo, Y.; Lomonte, B.; Gutiérrez, J.M. Venoms, Venomics, Antivenomics. FEBS Letters 2009, 583, 1736–1743, doi:10.1016/j.febslet.2009.03.029.
Gutiérrez, J.M.; Sanz, L.; Escolano, J.; Fernández, J.; Lomonte, B.; Angulo, Y.; Rucavado, A.; Warrell, D.A.; Calvete, J.J. Snake Venomics of the Lesser Antillean Pit Vipers Bothrops caribbaeus and Bothrops lanceolatus: Correlation with Toxicological Activities and Immunoreactivity of a Heterologous Antivenom. Journal of Proteome Research2008, 7, 4396–4408, doi:10.1021/pr8003826.
Savage, J.M. The Amphibians and Reptiles of Costa Rica. A Herpetofauna between Two Continents, between Two Seas; The University of Chicago: Chicago and London, 2002.
Lamar, W.; Sasa, Mahmood. A New Species of Hognose Pitviper, Genus Porthidium, from the Southwestern Pacific of Costa Rica (Serpentes: Viperidae). Revista de Biología Tropical.2003, 51, 797–804.
Bocourt, M.F. Descriptions de Quelques Crotaliens Nouveaux Appartenant au Genre Bothrops, Recueillis Dans Le Guatémala. Annales des sciences naturelles., Paris1868, 201–202.
Schlegel, H. Description d’une Nouvelle Espèce Du Genre Trigonocéphale (Trigonocephalus Lansbergii). Mag. Zool. Rept1841, 1–3.
Monteza-Moreno, C.M.; Ramos, C.; Martínez, V.; Sasa, M. On the identity of hog-nosed pit-vipers from western panama: a review of specimens of Porthidium lansbergii (Schlegel, 1841) in lower Central America. Tecnociencia (Panama)2020, 22, 27–44, doi:10.48204/j.tecno.v22n2a2.
De arco-Rodríguez, B.; Montealegre-Sánchez, L.; Solano-Redondo, L.; Castro-Herrera, F.; Ortega, J.G.; Castillo, A.; Vargas-Zapata, C.; Jiménez-Charris, E. Phylogeny and Toxicological Assessments of Two Porthidium lansbergii lansbergii Morphotypes from the Caribbean Region of Colombia. Toxicon2019, 166, 56–65, doi:10.1016/j.toxicon.2019.05.010.
Cisneros-Heredia, D.F.; Yánez-Muñoz, M. Reptilia, Viperidae, Crotalinae, Porthidium Nasutum: Distribution Extension and Remarks on Its Range and Records. Check List2005, 1, 16–17, doi:10.15560/1.1.16.
Warrell, D.A. Snakebites in Central and South America: Epidemiology, Clinical Features, and Clinical Management. In Venomous Reptiles of the Western Hemisphere; Campbell, J.A., Lamar, W.W., Comstock, Eds.; Cornell University: Ithaca, NY, 2004; Vol. 2, pp. 709–761.
Reyes-Velasco, J.; Cox, C.L.; Jones, J.M.; Borja, M.; Campbell, J.A. how many species of rattlesnakes are there in the Crotalus durissus species group (Serpentes: Crotalidae); Revista Latinoamericana de Herpetologia2022, 5, 43–55, doi:10.22201/fc.25942158e.2022.1.330.
Humboldt, A. Sur Deux Nouvelles Espèces de Crotles. In: Humboldt and Bonpland, 1813. Recueil d'observations de zoologie.1811, 2, 1–8.
Hoge, A.R. Preliminary Account on Neotropical Crotalinae (Serpentes Viperidae). Mem Inst Butantan1966, 32, 137–184.
García-Perez, J. Una Nueva Especie de Cascabel (Serpentes: Crotalidae) Para El Bolsón Árido de Lagunillas, Cordillera de Mérida, Venezuela. Latin American scientific contribution to ecology1995, 3, 7–12.
Harris, H.S.JR.; Simmons, R.S. A New Subspecies of Crotalus durissus (Serpentes: Crotalidae) from the Rupununi Savanna of Southwestern Guyana. Instituto Butantan1978, 305–311.
van Lidth de Jeude, T.W. On a Collection of Reptiles and Fishes from the West-Indies. Notes from the Leyden Museum1887, 9, 129–139.
Klauber, Laurence. A New Species of Rattlesnake from Venezuela. Transactions of the San Diego Society of Natural History1941, 9, 333–336.
Wallach, Van.; Williams, K.; Boundy, J. Snakes of the World: A Catalogue of Living and Extinct Species. Taylor and Francis, CRC Press2014, 1–1237.
Zaher, H.; Murphy, R.W.; Arredondo, J.C.; Graboski, R.; Machado-Filho, P.R.; Mahlow, K.; Montingelli, G.G.; Quadros, A.B.; Orlov, N.L.; Wilkinson, M.; et al. Large-Scale Molecular Phylogeny, Morphology, Divergence-Time Estimation, and the Fossil Record of Advanced Caenophidian Snakes (Squamata: Serpentes). PLoS One2019, 14, e0216148, doi:10.1371/journal.pone.0216148.
Sawaya, R.J.; M.O.A.V.& M.M. Composition and Natural History of a Cerrado Snake Assemblage at Itirapina, São Paulo State, Southeastern Brazil. Biota Neotropica2008, 8, 127–149.
Hartmann, P.A. Ecology of a Snake Assemblage in the Atlantic Forest of Southeastern Brazil. Papéis Avulsos de Zoologia 2009, 49, 343–360.
McDiarmid, R.W.; Campbell, J.A.; Touré, T.A. Snake Species of the World: A Taxonomic and Geographic Reference; 1st ed.; Herpetologists’ League, 1999; Vol. 1.
Fernandes, D.S.; Franco, F.L.; Fernandes, R. Systematic revision of the genus Lachesis Daudin, 1803 (Serpentes, Viperidae). Herpetologica2004, 60, 245–260, doi:10.1655/02-85.
Cubides-Cubillos, Sergio.; Loaiza-López, F.; Molina-Betancourth, J.; Agudelo-Sánchez, W. Lachesis acrochorda (García, 1896). Catálogo de Anfibios y Reptiles de Colombia2021, 7, 39–50.
Barrio-Amorós, C.L.; Corrales, G.; Rodríguez, S.; Culebras, J.; Dwyer, Q.; Flores, D.A. The Bushmasters (Lachesis Spp.): Queens of the Rainforest. Reptiles & Amphibians2020, 27, 358–381, doi:10.17161/randa.v27i3.14978.
Madrigal, M.; Sanz, L.; Flores-Díaz, M.; Sasa, M.; Núñez, V.; Alape-Girón, A.; Calvete, J.J. Snake Venomics across Genus Lachesis. Ontogenetic Changes in the Venom Composition of Lachesis stenophrys and Comparative Proteomics of the Venoms of Adult Lachesis melanocephala and Lachesis acrochorda. Journal in Proteomics2012, 77, 280–297, doi:10.1016/j.jprot.2012.09.003.
Diniz-Sousa, R.; Moraes, J. do N.; Rodrigues-da-Silva, T.M.; Oliveira, C.S.; Caldeira, C.A. A Brief Review on the Natural History, Venomics and the Medical Importance of Bushmaster (Lachesis) Pit Viper Snakes. Toxicon X2020, 7, 100053, doi:10.1016/j.toxcx.2020.100053.
Díaz-Ricaurte, Juan.; Guevara-Molina, C.; Cubides-Cubillos, Sergio. Lachesis Muta (Linnaeus 1766). Catálogo de Anfibios y Reptiles de Colombia2017, 3, 20–24.
Arteaga, A.; Pyron, R.A.; Batista, A.; Vieira, J.; Meneses Pelayo, E.; Smith, E.N.; Barrio Amorós, C.L.; Koch, C.; Agne, S.; Valencia, J.H.; y colaboradores y colaboradores Systematic Revision of the Eyelash Palm-Pitviper Bothriechis Schlegelii (Serpentes, Viperidae), with the Description of Five New Species and Revalidation of Three. Journal of Systematics and Evolution 2024, 8, 15–64, doi:10.3897/evolsyst.8.114527.
Calvete, J.J.; Escolano, J.; Sanz, L. Snake Venomics of Bitis Species Reveals Large Intragenus Venom Toxin Composition Variation: Application to Taxonomy of Congeneric Taxa. Journal of Proteome Research 2007, 6, 2732–2745, doi:10.1021/pr0701714.
Fry, B.G. From Genome to “Venome”: Molecular Origin and Evolution of the Snake Venom Proteome Inferred from Phylogenetic Analysis of Toxin Sequences and Related Body Proteins. Genome Research2005, 15, 403–420, doi:10.1101/gr.3228405.
Earl, S.T.H.; Birrell, G.W.; Wallis, T.P.; St Pierre, L.D.; Masci, P.P.; de Jersey, J.; Gorman, J.J.; Lavin, M.F. Post-Translational Modification Accounts for the Presence of Varied Forms of Nerve Growth Factor in Australian Elapid Snake Venoms. Proteomics2006, 6, 6554–6565, doi:10.1002/pmic.200600263.
Chippaux, J. P.; Williams2, V.; White’, J.; Chippaux, J. P.; Williabis, V. State Toxinology Service, Adelaide Children’s Hospital; 1991; Vol. 29.
Casewell, N.R.; Jackson, T.N.W.; Laustsen, A.H.; Sunagar, K. Causes and Consequences of Snake Venom Variation. Trends in Pharmacological Sciences2020, 41, doi:10.1016/j.tips.2020.05.006.
Fry, B.G.; Wüster, W. Assembling an Arsenal: Origin and Evolution of the Snake Venom Proteome Inferred from Phylogenetic Analysis of Toxin Sequences. Molecular Biology and Evolution 2004, 21, 870–883, doi:10.1093/molbev/msh091.
Wüster, W.; Peppin, L.; Pook, C.E.; Walker, D.E. A Nesting of Vipers: Phylogeny and Historical Biogeography of the Viperidae (Squamata: Serpentes). Molecular Phylogenetics and Evolution 2008, 49, doi:10.1016/j.ympev.2008.08.019.
Fry, B.G.; Winkel, K.D.; Wickramaratna, J.C.; Hodgson, W.C.; Wüster, W. Effectiveness of Snake Antivenom: Species and Regional Venom Variation and Its Clinical Impact. Journal of Toxicology: Toxin Reviews 2003, 22, 23–34, doi:10.1081/TXR-120019018.
Calvete, J.J.; Borges, A.; Segura, Á.; Flores-Díaz, M.; Alape-Girón, A.; Gutiérrez, J.M.; Diez, N.; De Sousa, L.; Kiriakos, D.; Sánchez, E.; y colaboradores y colaboradores Snake Venomics and Antivenomics of Bothrops colombiensis, a Medically Important Pitviper of the Bothrops atrox-asper Complex Endemic to Venezuela: Contributing to Its Taxonomy and Snakebite Management. Journal in Proteomics2009, 72, 227–240, doi:10.1016/j.jprot.2009.01.005.
Klupczynska, A.; Pawlak, M.; Kokot, Z.J.; Matysiak, J. Application of Metabolomic Tools for Studying Low Molecular-Weight Fraction of Animal Venoms and Poisons. Toxins (Basel)2018, 10.
Modahl, C.M.; Brahma, R.K.; Koh, C.Y.; Shioi, N.; Kini, R.M. Omics Technologies for Profiling Toxin Diversity and Evolution in Snake Venom: Impacts on the Discovery of Therapeutic and Diagnostic Agents. Annual Review of Animal Bioscience 2020, 8, 91–116.
Abd El-Aziz, T.M.; Soares, A.G.; Stockand, J.D. Advances in Venomics: Modern Separation Techniques and Mass Spectrometry. Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences 2020, 1160.
Walker, A.A.; Robinson, S.D.; Hamilton, B.F.; Undheim, E.A.B.; King, G.F. Deadly Proteomes: A Practical Guide to Proteotranscriptomics of Animal Venoms. Proteomics2020, 20, doi:10.1002/pmic.201900324.
Damm, M.; Hempel, B.F.; Süssmuth, R.D. Old World Vipers-a Review about Snake Venom Proteomics of Viperinae and Their Variations. Toxins (Basel)2021, 13.
Chippaux, J.-P.; Williams, V.; White, J. Snake Venom Variability: Methods of Study, Results and Interpretation. Toxicon1991, 29, doi:10.1016/0041-0101(91)90116-9.
Arbuckle, K. From Molecules to Macroevolution: Venom as a Model System for Evolutionary Biology across Levels of Life. Toxicon X2020, 6, doi:10.1016/j.toxcx.2020.100034.
Zancolli, G.; Casewell, N.R. Venom Systems as Models for Studying the Origin and Regulation of Evolutionary Novelties. Molecular Biology and Evolution 2020, 37, doi:10.1093/molbev/msaa133.
Fry, B.G. Venomous Reptiles and Their Toxins. Evolution, Pathophysiology, and Biodiscovery; Oxford University Press, USA., Ed.; Oxford University Press: New York, NY., 2015; Vol. 1.
Mackessy, S.P.; Saviola, A.J. Understanding Biological Roles of Venoms Among the Caenophidia: The Importance of Rear-Fanged Snakes. Integrative and Comparative Biology 2016, 56, 1004–1021, doi:10.1093/icb/icw110.
Fry, B.G.; Scheib, H.; van der Weerd, L.; Young, B.; McNaughtan, J.; Ryan Ramjan, S.F.; Vidal, N.; Poelmann, R.E.; Norman, J.A. Evolution of an Arsenal: Structural and Functional Diversification of the Venom System in the Advanced Snakes (Caenophidia). Molecular and Cellular Proteomics2008, 7, 215–246, doi:10.1074/mcp.M700094-MCP200.
Jackson, T.; Koludarov, I.; Ali, S.; Dobson, J.; Zdenek, C.; Dashevsky, D.; op den Brouw, B.; Masci, P.; Nouwens, A.; Josh, P.; y colaboradores y colaboradores Rapid Radiations and the Race to Redundancy: An Investigation of the Evolution of Australian Elapid Snake Venoms. Toxins (Basel)2016, 8, 309, doi:10.3390/toxins8110309.
Casewell, N.R.; Wüster, W.; Vonk, F.J.; Harrison, R.A.; Fry, B.G. Complex Cocktails: The Evolutionary Novelty of Venoms. Trends in Ecology & Evolution 2013, 28, 219–229, doi:10.1016/j.tree.2012.10.020.
Giorgianni, M.W.; Dowell, N.L.; Griffin, S.; Kassner, V.A.; Selegue, J.E.; Carroll, S.B. The Origin and Diversification of a Novel Protein Family in Venomous Snakes. Proceedings of the National Academy of Sciences2020, 117, 10911–10920, doi:10.1073/pnas.1920011117.
Amorim, F.; Costa, T.; Baiwir, D.; De Pauw, E.; Quinton, L.; Sampaio, S. Proteopeptidomic, Functional and Immunoreactivity Characterization of Bothrops moojeni Snake Venom: Influence of Snake Gender on Venom Composition. Toxins (Basel)2018, 10, 177, doi:10.3390/toxins10050177.
Queiroz, G.P.; Pessoa, L.A.; Portaro, F.C.V.; Furtado, M. de F.D.; Tambourgi, D. V. Interspecific Variation in Venom Composition and Toxicity of Brazilian Snakes from Bothrops Genus. Toxicon2008, 52, 842–851, doi:10.1016/j.toxicon.2008.10.002.
Kazandjian, T.D.; Petras, D.; Robinson, S.D.; van Thiel, J.; Greene, H.W.; Arbuckle, K.; Barlow, A.; Carter, D.A.; Wouters, R.M.; Whiteley, G.; y colaboradores y colaboradores Convergent Evolution of Pain-Inducing Defensive Venom Components in Spitting Cobras. Science (1979)2021, 371, 386–390, doi:10.1126/science.abb9303.
Barua, A.; Mikheyev, A.S. Toxin Expression in Snake Venom Evolves Rapidly with Constant Shifts in Evolutionary Rates. Proceedings of the Royal Society: Biological Sciences2020, 287, 20200613, doi:10.1098/rspb.2020.0613.
Cubides-Cubillos, S.D.; Alarcón–Pérez, J.C. Accidente Ofídico En Antioquia, Colombia: Análisis Etnobiológico de Las Construcciones Culturales. Revista Etnobiología2018, 16, 18–29.
Chippaux, J.-P. Snakebite Envenomation Turns Again into a Neglected Tropical Disease! Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases2017, 23, 38, doi:10.1186/s40409-017-0127-6.
Chippaux, J.-P. Epidemiology of Envenomations by Terrestrial Venomous Animals in Brazil Based on Case Reporting: From Obvious Facts to Contingencies. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases2015, 21, 13, doi:10.1186/s40409-015-0011-1.
Boldrini-França, J.; Corrêa-Netto, C.; Silva, M.M.S.; Rodrigues, R.S.; De La Torre, P.; Pérez, A.; Soares, A.M.; Zingali, R.B.; Nogueira, R.A.; Rodrigues, V.M.; y colaboradores y colaboradores Snake Venomics and Antivenomics of Crotalus durissus Subspecies from Brazil: Assessment of Geographic Variation and Its Implication on Snakebite Management. Journal in Proteomics2010, 73, 1758–1776, doi:10.1016/j.jprot.2010.06.001.
Rodríguez-Vargas, A.; Vega, N.; Reyes-Montaño, E.; Corzo, G.; Neri-Castro, E.; Clement, H.; Ruiz-Gómez, F. Intraspecific Differences in the Venom of Crotalus durissus cumanensis from Colombia. Toxins (Basel)2022, 14, doi:10.3390/toxins14080532.
Talukdar, A.; Maddhesiya, P.; Namsa, N.D.; Doley, R. Snake Venom Toxins Targeting the Central Nervous System. Toxin Reviews2023, 42, 382–406, doi:10.1080/15569543.2022.2084418.
Lewis, R.; Gutmann, L. Snake Venoms and the Neuromuscular Junction. Semin Neurol2004, 24, 175–179, doi:10.1055/s-2004-830904.
Rossetto, O.; Morbiato, L.; Caccin, P.; Rigoni, M.; Montecucco, C. Presynaptic Enzymatic Neurotoxins. Journal Neurochem2006, 97, 1534–1545, doi:10.1111/j.1471-4159.2006.03965.x.
Gawade, S.P. Snake Venom Neurotoxins: Pharmacological Classification. Journal of Toxicology: Toxin Reviews2004, 23, 37–96, doi:10.1081/TXR-120030647.
Calvete, J.J.; Sanz, L.; Cid, P.; De La Torre, P.; Flores-Díaz, M.; Dos Santos, M.C.; Borges, A.; Bremo, A.; Angulo, Y.; Lomonte, B.; y colaboradores y colaboradores Snake Venomics of the Central American Rattlesnake Crotalus simus and the South American Crotalus Durissus Complex Points to Neurotoxicity as an Adaptive Paedomorphic Trend along Crotalus Dispersal in South America. Journal of Proteome Research 2010, 9, 528–544, doi:10.1021/pr9008749.
Batista da Cunha, D.; Pupo Silvestrini, A.V.; Gomes da Silva, A.C.; Maria de Paula Estevam, D.; Pollettini, F.L.; de Oliveira Navarro, J.; Alves, A.A.; Remédio Zeni Beretta, A.L.; Annichino Bizzacchi, J.M.; Pereira, L.C.; y colaboradores y colaboradores Mechanistic Insights into Functional Characteristics of Native Crotamine. Toxicon2018, 146, 1–12, doi:10.1016/j.toxicon.2018.03.007.
Rádis-Baptista, G.; Kerkis, I. Crotamine, a Small Basic Polypeptide Myotoxin from Rattlesnake Venom with Cell-Penetrating Properties; 2011; Vol. 17.
Schenberg, S. Geographical Pattern of Crotamine Distribution in the Same Rattlesnake Subspecies. Science (1979) 1959, 129, 1361–1363.
Otero, R.; Osorio, R.G.; Valderrama, R.; Giraldo, C.A. Efectos farmacológicos y enzimaticos de los venenos de serpientes de Antioquia y Chocó (Colombia); Toxicon1992; Vol. 30.
Mora-Obando, D.; Plaid, D.; Lomonte, B.; Guerrero-Vargas, J.A.; Ayerbe, S.; Calvete, J.J. Antivenomics and in Vivo Preclinical Efficacy of Six Latin American Antivenoms towards Southwestern Colombian Bothrops asper Lineage Venoms. PLOS Neglected Tropical Diseases 2021, 15, 1–36, doi:10.1371/journal.pntd.0009073.
Arévalo-Páez, M.; Rada-Vargas, E.; Betancur-Hurtado, C.; Renjifo, J.M.; Renjifo-Ibáñez, C. Neuromuscular Effect of Venoms from Adults and Juveniles of Crotalus durissus cumanensis (Humboldt, 1811) from Guajira, Colombia. Toxicon2017, 139, 41–44, doi:10.1016/j.toxicon.2017.09.016.
Pereañez, J.A.; Núñez, V.; Huancahuire-Vega, S.; Marangoni, S.; Ponce-Soto, L.A. Biochemical and Biological Characterization of a PLA2 from Crotoxin Complex of Crotalus durissus cumanensis. Toxicon2009, 53, 534–542, doi:10.1016/j.toxicon.2009.01.021.
Mora-Obando, D.; Salazar-Valenzuela, D.; Pla, D.; Lomonte, B.; Guerrero-Vargas, J.A.; Ayerbe, S.; Gibbs, H.L.; Calvete, J.J. Venom Variation in Bothrops asper Lineages from North-Western South America. Journal in Proteomics2020, 229, 103945, doi:10.1016/j.jprot.2020.103945.
Jiménez-Charris, E.; Montoya-Gómez, A.; Torres, J.K.; Gómez-Díaz, M.; Bolívar-García, W. First Functional and Proteomic Analysis of Bothrops asper Snake Venom from Gorgona Island - Colombia, and Its Comparative Characterization with Two Colombian Southwest Ecoregions. Biochimie2022, 194, 19–27, doi:10.1016/j.biochi.2021.12.005.
Quintana, J.; Otero, R.; Nuñez, V.; Toro, F. Estudio de La Variabilidad En El Veneno de 2 Poblaciones de Bothriechis schlegelii Del Suroeste y Norte de Antioquia y Correlación Morfométrica. Iatreia2000, 1–107.
Montealegre-Sánchez, L.; Montoya-Gómez, A.; Jiménez-Charris, E. Individual Variations in the Protein Profiles and Functional Activities of the Eyelash Palm Pit-Viper (Bothriechis schlegelii) Venom from the Colombian Southwest Region. Acta Tropica2021, 223, 106113, doi:10.1016/j.actatropica.2021.106113.
Lomonte, B.; Escolano, J.; Fernández, J.; Sanz, L.; Angulo, Y.; Gutiérrez, J.M.; Calvete, J.J. Snake Venomics and Antivenomics of the Arboreal Neotropical Pitvipers Bothriechis lateralis and Bothriechis schlegelii. Journal of Proteome Research 2008, 7, 2445–2457, doi:10.1021/pr8000139.
Gutiérrez, J.; Escalante, T.; Rucavado, A.; Herrera, C. Hemorrhage Caused by Snake Venom Metalloproteinases: A Journey of Discovery and Understanding. Toxins (Basel)2016, 8, 93, doi:10.3390/toxins8040093.
Otero, R.; Gutiérrez, J.; Beatriz Mesa, M.; Duque, E.; Rodrı́guez, O.; Luis Arango, J.; Gómez, F.; Toro, A.; Cano, F.; Marı́a Rodrı́guez, L.; y colaboradores y colaboradores Complications of Bothrops, Porthidium, and Bothriechis Snakebites in Colombia. A Clinical and Epidemiological Study of 39 Cases Attended in a University Hospital. Toxicon2002, 40, 1107–1114, doi:10.1016/S0041-0101(02)00104-6.
Otero-Patiño, R. Snake Bites in Colombia. In: Vogel, CW., Seifert, S., Tambourgi, D. (eds) Clinical Toxinology in Australia, Europe, and Americas. Toxinology. Springer, Dordrecht; 2018; pp. 3–50. https://doi.org/10.1007/978-94-017-7438-3_41
Preciado, L.M.; Pereañez, J.A.; Comer, J. Potential of Matrix Metalloproteinase Inhibitors for the Treatment of Local Tissue Damage Induced by a Type P-I Snake Venom Metalloproteinase. Toxins (Basel)2019, 12, 8, doi:10.3390/toxins12010008.
Pereañez, J.A.; Preciado, L.M.; Fernández, J.; Camacho, E.; Lomonte, B.; Castro, F.; Cañas, C.A.; Galvis, C.; Castaño, S. Snake Venomics, Experimental Toxic Activities and Clinical Characteristics of Human Envenomation by Bothrocophias Myersi (Serpentes: Viperidae) from Colombia. Journal in Proteomics2020, 220, doi:10.1016/j.jprot.2020.103758.
Sevilla-Sánchez, M.-J.; Guerrero-Vargas, J.A.; Ayerbe-González, S.; Calderón-Leytón, J.J.; Lomonte, B.; Mora-Obando, D. Toxinological Profile and Histopathological Alterations Induced by Bothrocophias Campbelli Venom from Colombia. Acta Tropica2024, 250, 107094, doi:10.1016/j.actatropica.2023.107094.
Jiménez-Charris, E.; Montealegre-Sanchez, L.; Solano-Redondo, L.; Mora-Obando, D.; Camacho, E.; Castro-Herrera, F.; Fierro-Pérez, L.; Lomonte, B. Proteomic and Functional Analyses of the Venom of Porthidium lansbergii lansbergii (Lansberg’s Hognose Viper) from the Atlantic Department of Colombia. J Proteomics2015, 114, 287–299, doi:10.1016/j.jprot.2014.11.016.
Otero-Patiño, R.; Segura, Á.; Herrera, M.; Angulo, Y.; León, G.; Gutiérrez, J.M.; Barona, J.; Estrada, S.; Pereañez, A.; Quintana, J.C.; y colaboradores y colaboradores Comparative Study of the Efficacy and Safety of Two Polyvalent, Caprylic Acid Fractionated [IgG and F(Ab’)2] Antivenoms, in Bothrops asper Bites in Colombia. Toxicon2012, 59, 344–355, doi:10.1016/j.toxicon.2011.11.017.
Kalil, J.; Fan, H.W. Production and Utilization of Snake Antivenoms in South America. In; 2017; pp. 81–101.
Bermúdez-Méndez, E.; Fuglsang-Madsen, A.; Føns, S.; Lomonte, B.; Gutiérrez, J.; Laustsen, A. Innovative Immunization Strategies for Antivenom Development. Toxins (Basel)2018, 10, 452, doi:10.3390/toxins10110452.
Gutiérrez, J.M.; León, G.; Burnouf, T. Antivenoms for the Treatment of Snakebite Envenomings: The Road Ahead. Biologicals2011, 39, 129–142.
Theakston, R.D.G.; Reid, H.A. Development of Simple Standard Assay Procedures for the Characterization of Snake Venoms. Bulletin of the World Health Organization1983, 61, 949–956.
Rojas, G.; Jiménez, J.M.; Gutiérrez, J.M. Caprylic Acid Fractionation of Hyperimmune Horse Plasma: Description of a Simple Procedure for Antivenom Production; Toxicon1994, 32, 351-363, https://doi.org/10.1016/0041-0101(94)90087-6.
Lalloo, D.G.; Theakston, R.D.G. Snake Antivenoms. Journal of Toxicology: Clinical Toxicology 2003, 41, 277–290, doi:10.1081/CLT-120021113.
Bogarı́n, G.; Romero, M.; Rojas, G.; Lutsch, C.; Casadamont, M.; Lang, J.; Otero, R.; Gutiérrez, J.M. Neutralization, by a Monospecific Bothrops lanceolatus Antivenom, of Toxic Activities Induced by Homologous and Heterologous Bothrops Snake Venoms. Toxicon1999, 37, 551–557, doi:10.1016/S0041-0101(98)00193-7.
Bucher, B.; Canongel, D.; Thomas, L.; Tyburn, B. Clinical Indicators of Envenoming and Serum Levels of Venom Antigens Bitten by Bothrops lanceolafus in Martinique. Transactions of The Royal Society of Tropical Medicine. 1997 (2):186-90. doi: 10.1016/s0035-9203(97)90219-4..
Gutiérrez, J.M.; Theakston, R.D.G.; Warrell, D.A. Confronting the Neglected Problem of Snake Bite Envenoming: The Need for a Global Partnership. PLoS Medicine2006, 3, 0727–0731.
Layfield, H.J.; Williams, H.F.; Ravishankar, D.; Mehmi, A.; Sonavane, M.; Salim, A.; Vaiyapuri, R.; Lakshminarayanan, K.; Vallance, T.M.; Bicknell, A.B.; y colaboradores y colaboradores Repurposing Cancer Drugs Batimastat and Marimastat to Inhibit the Activity of a Group I Metalloprotease from the Venom of the Western Diamondback Rattlesnake, Crotalus Atrox. Toxins (Basel)2020, 12, 309, doi:10.3390/toxins12050309.
Calvete, J.J.; Pérez, A.; Lomonte, B.; Sánchez, E.E.; Sanz, L. Snake Venomics of Crotalus tigris: The Minimalist Toxin Arsenal of the Deadliest Neartic Rattlesnake Venom. Evolutionary Clues for Generating a Pan-Specific Antivenom against Crotalid Type II Venoms. Journal of Proteome Research2012, 11, 1382–1390, doi:10.1021/pr201021d.
Calvete, J.J.; Fasoli, E.; Sanz, L.; Boschetti, E.; Righetti, P.G. Exploring the Venom Proteome of the Western Diamondback Rattlesnake, Crotalus atrox, via Snake Venomics and Combinatorial Peptide Ligand Library Approaches. Journal of Proteome Research2009, 8, 3055–3067, doi:10.1021/pr900249q.
Romero-Giraldo, L.E.; Pulido, S.; Berrío, M.A.; Flórez, M.F.; Rey-Suárez, P.; Nuñez, V.; Pereañez, J.A. Heterologous Expression and Immunogenic Potential of the Most Abundant Phospholipase A2 from Coral Snake Micrurus dumerilii to Develop Antivenoms. Toxins (Basel)2022, 14, 825, doi:10.3390/toxins14120825.
Carvalho, B.M.A.; Santos, J.D.L.; Xavier, B.M.; Almeida, J.R.; Resende, L.M.; Martins, W.; Marcussi, S.; Marangoni, S.; Stábeli, R.G.; Calderon, L.A.; y colaboradores y colaboradores Snake Venom PLA 2s Inhibitors Isolated from Brazilian Plants: Synthetic and Natural Molecules. BioMed Research International 2013, 2013, 1–8, doi:10.1155/2013/153045.
Gómez-Betancur, I.; Gogineni, V.; Salazar-Ospina, A.; León, F. Perspective on the Therapeutics of Anti-Snake Venom. Molecules2019, 24, 3276, doi:10.3390/molecules24183276.
Quiroz, S.; Henao Castañeda, I.C.; Granados, J.; Patiño, A.C.; Preciado, L.M.; Pereañez, J.A. Inhibitory Effects of Varespladib, CP471474, and Their Potential Synergistic Activity on Bothrops asper and Crotalus durissus cumanensis Venoms. Molecules2022, 27, 8588, doi:10.3390/molecules27238588.
Mora-Obando, D.; Lomonte, B.; Pla, D.; Guerrero-Vargas, J.A.; Ayerbe-González, S.; Gutiérrez, J.M.; Sasa, M.; Calvete, J.J. Half a Century of Research on Bothrops asper Venom Variation: Biological and Biomedical Implications. Toxicon2023, 221, 106983, doi:10.1016/j.toxicon.2022.106983.
Calvete, J.J.; Rodríguez, Y.; Quesada-Bernat, S.; Pla, D. Toxin-Resolved Antivenomics-Guided Assessment of the Immunorecognition Landscape of Antivenoms. Toxicon2018, 148, 107–122, doi:10.1016/j.toxicon.2018.04.015.
Nguyen, L.-T.; Schmidt, H.A.; von Haeseler, A.; Minh, B.Q. IQ-TREE: A Fast and Effective Stochastic Algorithm for Estimating Maximum-Likelihood Phylogenies. Molecular Biology and Evolution 2015, 32, 268–274, doi:10.1093/molbev/msu300.
Kalyaanamoorthy, S.; Minh, B.Q.; Wong, T.K.F.; von Haeseler, A.; Jermiin, L.S. ModelFinder: Fast Model Selection for Accurate Phylogenetic Estimates. Nature Methods2017, 14, 587–589, doi:10.1038/nmeth.4285.
Revell, L.J. Phytools: An R Package for Phylogenetic Comparative Biology (and Other Things). Methods in Ecology and Evolution 2012, 3, 217–223, doi:10.1111/j.2041-210X.2011.00169.x.
Warrell, D.A. Snake Bite. The Lancet2010, 375, 77–88.
Ramakrishnan, M.A. Determination of 50% Endpoint Titer Using a Simple Formula. World Journal of Virology 2016, 5, 85, doi:10.5501/wjv.v5.i2.85.
Sells, P.G. Animal Experimentation in Snake Venom Research and in Vitro Alternatives. Toxicon2003, 42, 115–133.
Boivin, G.P.; Hickman, D.L.; Creamer-Hente, M.A.; Pritchett-Corning, K.R.; Bratcher, N.A. Review of CO₂ as a Euthanasia Agent for Laboratory Rats and Mice. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science 2017, 56, 491–499.
Reyes-Velasco, J. A revision of recent taxonomic changes to the eyelash palm pitviper ( Serpentes , Viperidae , Bothriechis schlegelii). Herpetozooa2024, 37, 1–14, doi:10.3897/herpetozoa.

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Autores

Teddy Angarita Sierra

Email: tgangaritas@unal.edu.co

Formacion Academica: Biólogo, Magister en Auditoria y Gestión Ambiental, Doctor en Ciencias Biología

Perfil Profesional: Herpetólogo, Taxónomo, Ecologó, Biólogo de la conservación, Ofidísmo

Afiliacion: Grupo de investigación Biodiversidad para la Sociedad, Dirección Académica, Universidad Nacional de Colombia sede De La Paz, Cesar, Colombia

CvLAC

ORCID

Jaime Andrés Pereañez Jiménez

Email: andrespj20@gmail.com

Formacion Academica: Químico Farmacéutico, Doctor en Ciencias Básicas Biomédicas

Perfil Profesional: Toxicología, Terapias alternativas, Bioquímica, Caracterización de toxinas

Afiliacion: Grupo de investigación Toxinología, alternativas terapéuticas y alimentarias, Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Alimentarias, Universidad de Antioquia.Grupo de investigación Promoción y Prevención Farmacéutica, Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Alimentarias, Universidad de Antioquia.

CvLAC

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Sergio D. Cubides-Cubillos

Email: sergio.cubides@usp.br

Formacion Academica: Biólogo, Magister en Educación, PhD (c) en Biotecnologia.

Perfil Profesional: Herpetólogo, Taxónomo, Ofidísmo, Sistematica Molecular

Afiliacion: Laboratorio de Ecología y Evolución, Instituto Butantan - São Paulo, Brasil.

CvLAC

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Mónica M. Saldarriaga Córdoba

Email: monysalda@gmail.com

Formacion Academica: Médico Veterinario, Magister en Ciencias Biomédicas. Doctora en Ciencias con mención en Ecología y Biolog'ia Evolutiva

Perfil Profesional: Bióloga Molecular, Biología Evolutiva y Bioinformática,

Afiliacion: Centro de Investigación en Recursos Naturales y Sustentabilidad (CIRENYS), Universidad Bernardo O´Higgins. Chile

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Revisores

William Lamar

Email:williamlamar@hotmail.com

Formacion Academica: Biólogo, Doctor en Zoología

Perfil Profesional: Taxónomo, herpetólogo, especialista en serpientes venenosas neotropicales, biodiversidad, ranas y tortugas.

Afiliacion: Universidad de Texas at Tyler

Nancy Oguiura

Email: nancy.oguiura@butantan.gov.br

Formacion Academica: Química Farmacéutica, Máster en Ciencias (Biología/Genética), Doctorado en Ciencias (Biología/Genética)

Afiliacion: Lab. Especial de Ecologia e Evolução Instituto Butantan

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¿Cómo reconócerlas?

Bothrops atrox

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Perfil Profesional: Herpetólogo, Taxónomo, Ecologó, Biólogo de la conservación, Ofidísmo

Afiliacion: Grupo de investigación Biodiversidad para la Sociedad, Dirección Académica, Universidad Nacional de Colombia sede De La Paz, Cesar, Colombia

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Perfil Profesional: Bióloga Molecular, Biología Evolutiva y Bioinformática,

Afiliacion: Centro de Investigación en Recursos Naturales y Sustentabilidad (CIRENYS), Universidad Bernardo O´Higgins. Chile

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